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目的:
1.透射电镜下了解盆底器官脱垂性疾病患者盆底组织超微结构的改变。
2.盆底器官脱垂性疾病患者静脉血睾酮、性激素结合球蛋白水平与盆底器官脱垂的关系。
3.应用免疫印迹法探讨盆底器官脱垂性疾病患者主韧带、阴道壁雄激素受体蛋白的表达。
4.应用免疫组化法探讨盆底器官脱垂性疾病主韧带、阴道壁雄激素受体蛋白的表达,了解雄激素受体与盆底器官脱垂性疾病的关系。
对象与方法:
1.对象:研究组为绝经后,均未用激素替代治疗,患有盆底器官脱垂性疾病的患者需行全子宫切除术者,年龄45-79岁,共38例。对照组为绝经后均未用激素替代治疗,未患有盆底器官脱垂性疾病的患者需行全子宫切除术者,年龄48-63岁,共23例。
2.取研究组两例,对照组一例,在透射电镜下了解盆底器官脱垂性疾病盆底组织超微结构的改变。
3.研究组及对照组手术前,留取静脉血,应用化学发光法测定血清睾酮、性激素结合球蛋白浓度。
4.应用免疫组化法研究研究组及对照组12°近穹隆阴道前壁和右侧主韧带组织雄激素受体的表达情况。
5.应用免疫印迹法研究研究组及对照组12°近穹隆阴道前壁和右侧主韧带组织雄激素受体的表达情况。采用雄激素受体c端、N端单克隆抗体和C端多克隆抗体,检测研究组和对照组上述组织雄激素受体。最后用C端多克隆抗体研究研究组与对照组雄激素受体表达的差异。
结果:
1.透射电镜下观察发现,盆底器官脱垂性疾病患者与对照组相比,其主韧带和阴道壁内成纤维细胞萎缩明显,细胞内细胞器减少、碎裂、溶解;而且胶原纤维疏松、断裂、界限模糊。无论是研究组还是对照组均未发现肌肉细胞或肌肉纤维。
2.盆底器官脱垂性疾病患者与对照组比较,其血清雄激素及性激素结合球蛋白无明显变化。
3.应用免疫组化法研究表明,盆底器官脱垂性疾病患者盆底主韧带和阴道壁雄激素受体表达增加;随年龄增加或器官脱垂的加重,未见雄激素受体表达的改变。
4.应用免疫印记的方法研究表明,三种不同抗体均能够发现110KD、90KD、45KD条带;应用C端多克隆抗体检测上述组织雄激素受体,发现研究组和对照组雄激素受体110KD表达无显著差异,比较阴道壁组织雄激素受体45KD条带无显著差异,但比较主韧带组织雄激素受体45KD条带显示研究组比对照组表达增加。
结论:
1.盆底器官脱垂性疾病患者阴道壁、主韧带组织中,纤维细胞、胶原纤维萎缩、断裂、疏松。盆底器官脱垂性疾病的发生、发展与组织内的纤维细胞、胶原纤维的变化有关联。
2.盆底器官脱垂性疾病患者血清雄激素、性激素结合球蛋白水平并无明显变化。盆底器官脱垂性疾病的发生与血清雄激素水平变化无相关性。
3.盆底器官脱垂性疾病患者主韧带、阴道壁局部雄激素受体增加。雄激素通过盆底组织中纤维细胞内的雄激素受体调控胶原纤维的含量与组成,可能为阐释盆底器官脱垂性疾病的发病机制提供科学依据。