目 的 （一）体外测定不同浓度生脉溶液对超氧阴离子自由基的作用，探讨生脉注射液抗自由基作用的机制。 （二）利用沙土鼠脑缺血及缺血再灌注模型，观察生脉注射液的抗氧化作用及对缺血后神经细胞凋亡的影响。 （三）通过对缺血及缺血再灌后沙土鼠脑组织超氧化物岐化酶（SOD）、脂质过氧化物（LPO）的测定、缺血后神经细胞凋亡的形态观察、P53、Bc1-2、NF-κB表达的检测，论证生脉注射液对缺血性脑损伤保护作用的可能机制。 （四）应用生脉注射液加川芎注射液治疗急性脑梗死病人，从临床进一步论证生脉注射液在缺血性脑血管疾病中的治疗作用。 方法 （一）二甲基亚砜（DMSO）在碱性有氧条件下，产生超氧阴离子自由基，以此为实验体系。采用电子顺磁共振（EPR）方法，分别测定不同浓度药物组及对照组中超氧阴离子信号强度。 （二）采用沙土鼠作为本研究的实验动物，随机分为对照组、缺血组、缺血再灌注组、缺血治疗组、再灌注治疗组，每组8只。缺血/再灌注治疗组应用生脉注射液20ml/kg、腹腔注射。各组沙土鼠均于24小时断头，获取前脑组织分别制取脑匀浆并测定超氧化物岐化酶（SOD）、脂质过氧化物（LPO）；常规固定、包埋前脑组织、分别进行HE染色、TUNEL染色、p53、Bc1-2及NF-κB免疫组织化学染色。 （三）选择住院或急诊留观急性脑梗死病人70例，发病72小时内，随机分为对照组，川芎治疗组，生脉加川芎治疗组，治疗前后均进行神经功能缺损评分，并进一步进行疗效评定。 （四）统计学处理：在体外实验部分，计算不同浓度生脉注射液的K值、R 簧二毕厘大学砚士学泣材艾 中文赧要 值；在动物实验部分，采用方差分析比较各组间SOD活性、LPO含量、凋亡细 胞数以及 p53、BclZ、NF4 B蛋白免疫组化染色灰度值，采用直线相关分析判 断缺血再灌注组中 SOD活性、LPO含量、p53、BCI上、NF－K B蛋白表达、凋亡 细胞数之间的的相关性；在临床部分，一般资料对比较采用 X‘，t检验，三治疗 组间比较用方差分析，治疗组间疗效评定用idit分析。 结果 （一）当生脉注射液浓度小于 40％时，其 K值＞l，R值为 117．7％一252l ％，对超氧阴离子自由基产生有增强作用；当生脉注射液浓度浓度大于60％时， 其 K值＜l，其 R值在 80％习2％之间，对超氧阴离子自由基有清除作用。 （二）缺血／再灌注组中，sOD活性明显降低，LPO含量明显升高，T UNUNEL 染色阳性计数明显增多，p53、NF4 B免疫组织化学染色灰度值明显降低，BC12 灰度值明显增高，与对照组比较均相差显著中叱刀 1）；缺血／再灌注治疗组中， 以上各指标变化不明显，与对照组比较相差不显著中）0刀5）；SOD活性、BCI 2表达与凋亡细胞数呈显著负相关中＜0刀1），LPO含量、p53、NF儿B兔疫组 织化学染色灰度值与凋亡细胞数呈显著正相关…功刀 1）。 （三）生脉注射液加川尊注射液组治疗急性脑梗死有显著疗效，与只应用川 穹注射液组比较差异显著中功刀5）。 结论 （一）体外研究表明，高浓度的生脉注射液对超氧阴离子具有直接清除作用； 低浓度的生脉注射液对超氧阴离子的产生有促进作用：生脉注射液在不同浓度时 具有双向调节作用，说明中药多组成分共存时协同效应的复杂性。 （二）动物实验表明，生脉注射液能够通过抗氧化作用保护缺血后、尤其是 再灌注后损伤的脑组织；同时通过恢复SOD活性、降低LPO水平，降低促凋亡 基因表达、促进凋亡抑制基因表达，进而减轻脑缺血后神经细胞凋亡的发生。 （三）临床应用生脉注射液治疗急性脑梗死结果表明，生脉注射液在治疗缺 血性脑血管病中有较好的疗效，可以在临床中广泛应用。