γ-癸内酯产生菌选育、发酵条件优化及其细胞固定化的研究

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γ-癸内酯(GDL)是一种内酯类香味物质,主要用于配制奶油、桃子、柑橘和椰子型等香精。本文对耶罗维亚酵母(Yarrowia lipolytica) As2.1405以蓖麻油为底物发酵生产γ-癸内酯的可行性、诱变选育高产菌、发酵条件及细胞固定化进行了研究。本实验以购买的一株Yarrowia lipolytica As2.1405为出发菌,GDL的发酵产量为143mg/L。经紫外线和硫酸二乙酯诱变后,其突变株Y-1-6的发酵能力提高到318mg/L。论文对突变株Y-1-6发酵产生GDL的条件进行单因素和正交优化。优化后的发酵培养基(g/L)如下:蓖麻油60,蛋白胨30,酵母浸出汁25,Na2HPO4·12H2O 1.2,吐温-80 4,KH2PO4 1.5,pH6.5,温度25℃,接种量8%,装液量50mL/500mL三角瓶。在该条件下,培养48h,GDL产量达402mg/L。为了降低产物对细胞的毒性,进一步提高GDL的产量,本研究还采用了细胞固定化技术。利用聚乙烯醇和卡拉胶固定化耶罗维亚酵母,制备出机械强度高、传质效果好的凝胶颗粒发酵生产GDL。以小球强度和GDL产量为主要指标,确定发酵生产GDL的最佳条件。在聚乙烯醇80g/L,卡拉胶5g/L,菌体添加量0.1g/mL,固定化时间24 h,GDL产量达482mg/L。酵母经固定化后,GDL产量比未固定化细胞发酵生产的402mg/L提高了20%。
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