匍匐翦股颖SAUR71基因克隆及初步功能鉴定

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SAUR基因(small auxin up RNA)家族在生长素诱导初期做出响应,是生长素早期响应的基因家族之一。匍匐翦股颖(Agrostis stolonifera)为禾本科翦股颖属(Agrostis),因具有较强的耐寒性、耐荫性、耐低修剪度而被广泛用于运动场建植的多年生冷季型草坪草,具有广阔的应用前景。SAUR基因功能研究近年来才被广泛关注,但由于该家族基因功能较为复杂,许多基因功能尚未明确,而在匍匐翦股颖中该基因研究较少。本实验以匍匐翦股颖Penn A-4品种为材料,在匍匐翦股颖中克隆出SAUR71基因,构建3302Y-SAUR71植物表达载体,通过农杆菌侵染转入匍匐翦股颖中。在遗传转化过程中,愈伤组织继代培养基添加0.3mg/L KT、0.1mg/L6-BA与300mg/L水解酪蛋白以形成较多的分化率较高的胚性愈伤组织,在该愈伤组织诱导体系中出愈率达到57.2%。在进行诱导愈伤组织形成过程中,提高KT与6-BA浓度促进愈伤组织分化,最终使愈伤组织分化率达到83.7%。最终获得24株转基因植株,其中7株表达量较高。转基因植株叶片出现细软卷曲和早衰现象,匍匐茎表现出分枝增加、不定芽数量显著增加现象,转基因植株根系则表现生长缓慢、复杂性降低,转基因植株整体呈现生长缓慢和早衰现象。转基因植株同野生型相比,IAA含量普遍较高,而ABA含量则相对较低。SAUR71基因使匍匐翦股颖叶片、根系和匍匐茎发生不同程度的形态结构变化,并且使整个植株出现明显早衰现象,实验结果说明该基因对于匍匐翦股颖生长发育的调控具有重要意义,而在以往实验中并未对SAUR71基因功能进行研究。本实验对SAUR71基因进行了转化和初步功能分析,为进一步探究基因功能提供了一定依据。
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