论文部分内容阅读
近年来,大豆进口量不断增多,且转基因大豆占很大比例,市场上转基因大豆制品随处可见,基于以上情况,我国本土非转基因大豆可能存在被污染的风险。因此,我们选择706份国内大豆品种(品系),进行转基因成分的PCR定性检测。本文对大豆中可能含有的多个调控元件Ca MV35S启动子、FMV35S启动子和NOS终止子、以及针对我国批准进口的主要耐除草剂转基因大豆转化体GTS40-3-2和MON89788含有的目的基因EPSPS进行PCR检测,同时通过对MON89788转化体序列自行设计EPSPS引物序列,扩增出381 bp目的条带,为建立MON89788大豆转化体特异性定性PCR检测方法,设计5’端和3’端旁侧序列引物,扩增出445 bp和340 bp的产物,此方法可适用于MON89788大豆的特异性检测。在706份大豆品种中,最终测得含有Ca MV35S启动子的转基因成分所占比例为1%,含有FMV35S启动子的转基因成分所占比例为0.85%,含有NOS终止子的转基因成分所占比例为0.71%,含有EPSPS目的基因的转基因成分所占比例为0.85%,耐除草剂转基因品系MON89788所占比例为0.85%。以此评估转基因大豆所占比例,为农业转基因监管部门开展转基因大豆监测工作提供数据支持。关于转基因作物的非预期效应是,一直困扰着转基因作物商业化的发展。非靶向代谢组学具有分析多种代谢产物的能力,可以用为转基因作物实质等效评估方法之一。本研究基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)的非靶标代谢组学分析转基因大豆GE-J16和其受体非转基因大豆Jack根、茎、叶的代谢差异,本文针对转基因的处理组与对照组进行分析,最终共筛选出55种显著差异代谢物(VIP>1,P≤0.05),其中27种上调表达,28种下调表达,差异代谢物主要包括氨基酸、有机酸、脂肪酸、类固醇等,在大豆根中,ESI正离子模式下,γ-亚麻酸和纤维二糖含量变化较大,ESI负离子模式下,山梨醇含量变化明显;在大豆茎中,ESI正离子模式下,1-氨基环丙烷羧酸和氢化可的松含量变化较大,ESI负离子模式下,组氨酸变化明显;在大豆叶中,并未有化合物的含量变化。代谢差异物的分析表明,转基因大豆GE-J16和其受体非转基因大豆Jack之间的代谢差异物均在自然差异范围之内,不存在非预期效应。