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第一部分:桃核承气汤改善脓毒症患者肠功能障碍的临床研究。目的:评价桃核承气汤对脓毒症患者肠功能障碍的改善作用。方法:采用病例对照研究设计,收集2011年01月-2019年10月期间于广东省中医院综合病区住院,诊断为脓毒症且存在肠功能障碍患者的临床资料。选择其中使用过桃核承气汤治疗,且临床资料较完整的患者为病例组;选择同期未使用中药桃核承气汤,且临床资料较完整的的患者为对照组。详细记录两组患者的人口学信息、既往病史、感染部位、临床症状及治疗前后肠功能障碍评分、肠鸣音次数、SOFA评分、APACHE Ⅱ评分及炎症指标等,记录患者预后情况,如治愈、发展为MODS、或死亡,采用SPSS 17.0统计软件包对两组治疗前后及治疗后两组间各项指标进行比较。结果:1.两组间治疗前肠功能障碍评分、肠鸣音次数、SOFA评分及APACHE Ⅱ评分差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较,两组治疗后肠功能障碍评分、肠鸣音次数、SOFA评分及APACHE Ⅱ评分均明显改善,前后比较差异均有统计学意义(P<0.05)。两组间治疗后比较,病例组在肠功能障碍评分、肠鸣音次数、SOFA评分等方面改善更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。提示桃核承气汤能改善脓毒症患者的肠功能障碍。2.两组间治疗前白细胞计数、CRP、PCT、TNF-α、IL-1 β、IL-6水平差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较,两组治疗后白细胞计数、CRP、PCT、TNF-α、IL-1 β、IL-6水平均明显下降,前后比较差异有统计学意义(P<0.05);两组间治疗后比较,病例组TNF-α、IL-1 β、IL-6水平较对照组下降更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。提示桃核承气汤可降低脓毒症患者的炎症反应。结论:桃核承气汤能改善脓毒症患者的肠道功能障碍,减轻机体炎症反应。第二部分:桃核承气汤调节CLP大鼠肠黏膜免疫,改善肠功能障碍的作用与机制研究。目的:采用盲肠结扎穿刺术(CLP)制作脓毒症大鼠模型,探讨桃核承气汤通过调节肠黏膜免疫、炎症免疫反应等改善脓毒症肠功能障碍的作用与机制。方法:SPF级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠48只,体重(200±50)g,随机分为假手术组、CLP模型组、桃核承气汤组,共3组,每组16只。所有分组的大鼠正常饮食饮水,中药组(灌胃)预给药1周,术后待大鼠苏醒再给药1次。术前12h及术后禁食,自由饮水,称量大鼠,腹腔注射10%水合氯醛(350mg/kg)麻醉。假手术组仅开腹后翻动盲肠,其余2组均采用盲肠结扎穿孔法建立脓毒症模型。各组于造模后24h时间点处死大鼠,采集血液及组织标本。HE染色光镜下观察肠道组织病理变化;TUNEL染色观察大鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡情况;ELISA法检测血清TNF-α、IL-6、IL-10水平及大鼠肠黏液样品SIgA水平;流式细胞技术检测外周血淋巴细胞凋亡水平、免疫细胞表面CD4+T细胞、CD8+T细胞表达水平及CD4+T细胞表面PD-1/PD-L1表达水平。结果:1.肠道组织病理结果及回肠黏液SIgA含量检测:假手术组肠黏膜完整,未见炎性细胞渗出,而CLP模型组及桃核承气汤组均有不同程度的改变。CLP模型组可见黏膜层破坏,结构紊乱,血管充血扩张,大量的炎性细胞浸润,部分可见坏死组织;桃核承气汤组黏膜层部分缺失,炎性细胞浸润明显比CLP模型组少。大鼠回肠黏液SIgA含量的检测中,可发现CLP模型组及桃核承气汤组与假手术组相比,均有不同程度的下降,而桃核承气汤组与CLP模型组相比,又有明显的上升,差异均具有统计学意义(P<0.05)。提示桃核承气汤可改善肠道组织的病理损伤、修复肠黏膜。2.炎症免疫功能的改变:TNF-α、IL-6及IL-10水平与假手术组对比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);而桃核承气汤治疗组与CLP模型组相比,TNF-α及IL-6水平明显下降,IL-10水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。TUNEL法检测胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡发现,CLP模型组及桃核承气汤组较假手术组凋亡率明显升高,而桃核承气汤组与CLP模型组相比可下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);流式细胞技术检测外周血淋巴细胞凋亡发现,CLP模型组及桃核承气汤组较假手术组凋亡率升高,而桃核承气汤组与CLP模型组相比可下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。在流式细胞技术检测外周血CD4+T、CD8+T细胞表达水平中,CLP模型组与桃核承气汤组较假手术组明显下降;而桃核承气汤组与CLP模型组相比,CD4+T、CD8+T细胞比例及CD4+T/CD8+T细胞比值均上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。3.PD-1/PD-L1改变:在CD4+T细胞表面PD-1/PD-L1表达水平中,CLP模型组及桃核承气汤组与假手术组相比,均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);桃核承气汤组与CLP模型组对比,其PD-1/PD-L1表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:桃核承气汤可改善CLP大鼠损伤的肠道组织病理变化,这一作用可能与其提高SIgA免疫球蛋白的水平,减轻炎症反应,减少淋巴细胞凋亡并提高CD4+T、CD8+T细胞的免疫水平,降低PD-1/PD-L1表达水平,进而调节肠道免疫有关。