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第一部分基于适配体识别及核酸外切酶Ⅲ信号放大的荧光传感器构建和对多巴胺的测定研究目的:基于核酸外切酶Ⅲ（Exonuclease III）和赛博绿（SYBRGreen I）染料辅助信号放大技术和适配体特异性识别,本研究建立了无标记的荧光适配体传感器用于多巴胺的检测。方法:SYBR Green I作为荧光指示剂,能够嵌入双链DNA（ds DNA）中,产生绿色荧光。本研究设计了一条模板DNA（t DNA）包含两个区域:一部分区域的碱基能够与互补链（cDNA）完全互补,另一部分碱基则与适配体发生部分互补。将不同浓度的多巴胺加入到体系中会自动触发Exonuclease III发生酶切,SYBR Green I释放,从而导致荧光信号明显减小。因此,通过荧光信号减少量对多巴胺进行定量检测。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术验证了所建立的传感器检测多巴胺的可行性。建立了百草枯中毒的小鼠模型,取对照组和染毒组小鼠的脑组织,处理后测定了其中的多巴胺含量。结果:在最佳优化条件下,多巴胺的浓度在1.0×10-10 mol/L-1.0×10-9mol/L范围内与荧光变化呈现良好的线性关系,其中检出限为8.0×10-11mol/L。加标样品的回收率和相对标准偏差范围分别为95.0-102.2%和0.14-0.21%。结论:建立的适配体传感器具有良好的选择性,操作简单,实验结果令人满意,并成功应用于小鼠脑组织中多巴胺的检测。由于构建的荧光适配体传感器具有很高的灵敏度和选择性,不仅可以应用于多巴胺的常规检测,还可以应用于疾病诊断。第二部分基于适配体识别及G-四链体纳米导线信号放大的共振瑞利散射传感器的构建和对多巴胺的测定研究目的:基于适配体的特异性识别和G-四链体纳米线（G-wires）的共振瑞利散射特性,本研究建立了检测多巴胺的新方法。方法:利用多巴胺适配体识别目标多巴胺,激活核酸外切酶Ⅲ酶切发夹DNA,Mg2+和K+存在的情况下诱导G-纳米线的形成。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳证实了共振瑞利散射适配体传感器检测多巴胺的可行性,本研究建立了G-纳米线共振瑞利散射强度与多巴胺浓度之间的定量关系。建立了动脉粥样硬化的小鼠模型,取对照组和实验组小鼠的脑组织,处理后测定了其中的多巴胺含量。结果:优化了反应体系中Mg2+浓度、反应温度、反应时间、核酸外切酶Ⅲ浓度等实验条件,考察了尿酸、抗坏血酸、五羟色胺等干扰物质对多巴胺适配体传感器的干扰性。在最佳优化条件下,共振瑞利散射强度在363 nm处达到峰值,多巴胺浓度在5.0×10-11 mol/L-1.0×10-8 mol/L范围内,共振瑞利散射强度与多巴胺浓度的对数呈现良好的线性关系,检出限为1.2×10-11 mol/L。加标样品的回收率和相对标准偏差分别为88.89%-91.67%和1.28%-1.45%。结论:本研究建立的共振瑞利散射适配体传感器选择性好,灵敏度高,实验结果令人满意,可应用于小鼠脑组织中多巴胺水平的检测。