脂肪酶催化樟树籽仁油和大豆油合成中长碳链甘油三酯及其分离纯化

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中长碳链甘油三酯是一类天然油脂的改性产品,因其既可快速高效地为机体提供能量而不造成脂肪累积,又可为人体提供必需脂肪酸而成为油脂研究领域的焦点。本研究以资源丰富、至今未被充分利用的天然中碳链油脂—樟树籽仁油和大宗油料—大豆油为原料,在无溶剂体系下通过固定化脂肪酶催化酯交换法制备中长碳链甘油三酯。通过比较三种固定化脂肪酶的催化酯交换效果,确定Novozym 435脂肪酶为最合适的催化剂。影响酯交换反应的条件有:底物摩尔比(樟树籽仁油/大豆油)、加酶量、反应温度、反应时间。在单因素实验的基础上,设计四因素三水平的BBD响应面实验,优化并确定中长碳链甘油三酯的制备条件。实验结果表明,Novozym 435脂肪酶在无溶剂体系下催化樟树籽仁油和大豆油制备中长碳链甘油三酯的最佳酯交换反应条件是:樟树籽仁油/大豆油(mol/mol)为1.2、加酶量为总底物的10.5%(wt/wt%)、反应温度为65°C和反应时间为10.6h,最佳酯交换反应条件下的中长碳链甘油三酯的最高产率为74.82%。经过放大实验,然后将酯交换产物经过二级分子蒸馏方法得到纯度为94.92%的中长碳链甘油三酯。纯化后中长碳链甘油三酯的主要甘油三酯成分为COC/CPC(37.28%)、CLC/CLn La/CLn Ln(18.67%)、La LL/La OLa/La PLa(11.62%)、CLL(7.83%)以及La LL/La LLa/La Ln L(9.26%)。进一步比较了樟树籽仁油、大豆油、物理混合、酯交换产物、纯化后的中长碳链甘油三酯的脂肪酸组成和分布,结果表明中长碳链甘油三酯的总脂肪酸包含61.37%的中碳链脂肪酸和38.63%的长碳链脂肪酸,饱和脂肪酸的含量为68.99%,不饱和脂肪酸的含量为31.01%。中长碳链甘油三酯分子的sn-2位主要富含油酸(16.59%)和亚油酸(33.47%),sn-1,3位主要富含癸酸(43.80%)和月桂酸(31.34%)。另外中长碳链甘油三酯的各项理化性质指标都符合国家标准。然后分析酯交换反应中Novozyme 435脂肪酶的操作稳定性,研究表明保持80%以上的酶活至少可以重复使用15次。由于这种构型的中长碳链甘油三酯对人体有益,可以作为一种营养添加剂,在功能性油脂、保健品、医疗食品等领域具有较大的应用潜力。
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