论文部分内容阅读
在世界范围内,前列腺癌(PCa)是男性第二高发癌症,也是男性第五大致死癌症。约90%的肿瘤致死病例都是由于肿瘤转移造成的,而转移也是前列腺癌的主要致死原因,一旦发生转移预后很差。尽管很多研究都成功地揭示了一些特异性调控因子在前列腺癌细胞迁移和侵袭过程中的作用,但前列腺癌转移发生的原因和机制至今仍然不是很清楚。据报道,除了一些经典的调控因子,micro RNA(miRNA)能够在表观水平调控前列腺癌的转移过程。MiRNA是一类内生的含有19至25个核苷酸的非编码RNA,能够在转录后水平调控基因的表达。研究发现,在人类全基因组中,miRNA所调控的编码基因大约占总数的1/3,并且已发现的miRNA中有大约一半定位在肿瘤相关的基因脆性位点,表明miRNA在肿瘤的发生发展过程中发挥着重要作用。本课题探讨了miR-33b对前列腺癌细胞转移能力的影响。通过检测不同迁移能力的前列腺癌2B4和IE8细胞中miR-33b双臂表达水平,我们发现miR-33b的表达水平与前列腺癌细胞转移能力负相关,提示miR-33b可能抑制前列腺癌细胞转移。体外划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验证明,过表达miR-33b对前列腺癌细胞迁移和侵袭具有抑制作用。此外,本研究还发现在前列腺癌LNCap、2B4和IE8细胞中,miR-33b-3p的表达远高于miR-33b-5p,表明在前列腺癌细胞转移过程中miR-33b-3p可能发挥作用。本研究利用生物信息学方法分别预测并筛选出miR-33b-5p和miR-33b-3p与转移相关的靶基因。通过实时荧光定量PCR确认过表达miR-33b能够下调SALL4、DOCK4的表达,双荧光素酶报告分析证实miR-33b-5p靶向SALL4而miR-33b-3p靶向DOCK4。以上结果说明miR-33b可能是通过调控SALL4和DOCK4的表达来抑制前列腺癌细胞的转移。因此,本研究发现miR-33b抑制前列腺癌细胞转移。在前列腺癌细胞中,以miR-33b-3p表达为主,miR-33b-3p的抗转移作用可能为前列腺癌的临床治疗提供新的方案。