柚皮苷提取纯化及其降血糖活性研究

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目的研究从柚皮中使用乙醇作为溶剂提取柚皮苷的优化工艺;对从提取物中分离和纯化柚皮苷的方法加以研究;观察柚皮苷对不同药物造成的糖尿病模型动物的血糖及其体内抗氧化水平的影响。方法建立高效液相色谱测定柚皮中柚皮苷含量的方法。运用正交试验设计考察乙醇浓度、提取温度、提取时间和乙醇用量对提取率的影响。采用聚酰胺柱层析分离柚皮苷。两步结晶法对提取物中的柚皮苷进行精制。小鼠腹腔注射四氧嘧啶造成糖尿病模型,灌胃柚皮苷,观察对其血糖和抗氧化水平的影响。大鼠给予高脂肪高热量饲料结合腹腔注射小剂量链脲菌素造成具有胰岛素抵抗的2型糖尿病模型,灌胃柚皮苷,观察对大鼠体重、空腹血糖、血糖释放、胰岛素释放,血脂和肝脏抗氧化水平影响。结果建立了高效液相色谱法测定柚皮中柚皮苷含量的方法。标准曲线线性范围10-80μg·mL-1,精密度、重现性、稳定性、加样回收率均符合要求。乙醇提取柚皮苷的最佳工艺为20倍原料重的60%乙醇、90℃条件下保温浸提2h;经过聚酰胺柱层析分离,两步结晶法所得柚皮苷精制品的纯度为75.61%,得率为19.38%。柚皮苷可以显著降低糖尿病鼠的空腹血糖,提高SOD活力,降低MDA含量。还能降低大鼠的血糖、胰岛素释放曲线,降低体内脂质水平。结论在本课题的优化提取工艺和分离纯化工艺下,能够得到较高含量的柚皮苷,但纯度有待进一步提高;柚皮苷对四氧嘧啶和链脲菌素造成的高血糖均有显著的降低作用。柚皮苷能提高糖尿病鼠体内抗氧化水平,纠正血糖、血脂代谢紊乱,减轻胰岛素抵抗。
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