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【目的】探究BCL-xL抑制剂是否可以增强溶瘤病毒Ad-tBID在体内、体外的抗肿瘤效应,并初步探究其作用机制。【方法】Western Blot、免疫荧光实验检测肿瘤细胞中Ad-tBID介导的tBID过表达效应;qPRC实验检测Ad-tBID在正常细胞与肿瘤细胞中的复制能力;细胞活性实验检测肿瘤细胞对Ad-tBID的敏感性;利用细胞活性实验筛选BH3模拟物中与Ad-tBID联合应用杀伤效应最显著者,并初步确认联合应用作用靶标;检测siRNA下调BCL-xL表达后,Ad-tBID对肿瘤细胞的杀伤效应;Western Blot分别检测不同MOI的Ad-tBID处理下、不同浓度A-1331852处理下,肿瘤细胞中BCL-2家族表达变化;qPCR检测4种对Ad-tBID中度敏感的肿瘤细胞系,在Ad-tBID处理后BCL-2家族转录水平变化;免疫荧光实验检测接受Ad-tBID处理后的肿瘤细胞中BAK表达量及定位改变;结晶紫染色实验评估A-1331852/Ad-tBID方案体外抗肿瘤效应;JC-1检测A-1331852、Ad-tBID、A-1331852/Ad-tBID处理下肿瘤细胞线粒体电势;测定A-1331852、Ad-tBID、A-1331852/Ad-tBID处理下caspase-3、caspase-9活性;研究A-1331852/Ad-tBID联合用法在小鼠皮下异位移植肿瘤模型中的效果;免疫组织化学实验检测Ad-tBID在肿瘤中的复制情况,以及不同处理组中肿瘤分裂生殖能力、肿瘤细胞凋亡程度。【结果】Ad-tBID介导肿瘤细胞中呈浓度依赖性的tBID过表达;Ad-tBID特异性在肿瘤细胞中复制;不同肿瘤细胞对Ad-tBID存在敏感性差异;BH-3模拟物筛选实验得到BCL-xL抑制剂A-1331852与Ad-tBID联合应用DAUC值最高;siRNA实验确认下调BCL-xL表达后,Ad-tBID抗肿瘤效应增强最显著;Ad-tBID和A-1331852通过促进BAK寡聚化形成二聚体或多聚体,进而发挥下游效应;A-1331852/Ad-tBID处理后,肿瘤细胞线粒体外膜去极化,caspase-3、caspase-9活性上调显著;A-1331852提高Ad-tBID在小鼠体内抗肿瘤效应显著。【结论】BCL-xL抑制剂A-1331852与溶瘤病毒Ad-tBID与联合应用,通过促进BAK寡聚化,活化线粒体凋亡途径,提高Ad-tBID在体内体外实验中的抗肿瘤效应。