酶解猪血血红蛋白制备小肽粉方法的研究

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猪血红蛋白是猪血中的重要营养成分,它的量占到了全血蛋白质总量的2/3和血细胞蛋白质总量的90%以上。已有研究证明,小肽适用于不能消化和吸收完整蛋白质的病人和易过敏病人,能避免完整蛋白质引起的免疫调节过敏反应;有利于矿物质元素的吸收和利用;某些小肽还具有免疫活性作用,等等。多数猪血是农业和食品加工业上的废弃物,开展酶解猪血红蛋白制备小肽产物的研究能够变废为宝,同时也防止了废弃血液直接排放可能带来的环境危害,因此有着重大的环保意义和经济价值。为了研究酶解猪血红蛋白制备小肽液的最佳酶解条件,采用正交试验法研究了酶种类、底物浓度、酶浓度、PH和水解时间五种因素,对水解物的总氮、氨基氮、水解率、含氮物收率和粗肽的含量五项指标进行了测定。结果表明,复合酶的水解能力最好,最佳配比为木瓜蛋白酶:中性蛋白酶=6:4,研究得出底物浓度10%,酶浓度6000U/g,水解时间10h,水解温度为50℃是酶解猪血红蛋白的最佳酶解条件。为了得到较好的小肽产品,研究了活性炭脱色方法的最优条件。在试验中不同的温度、pH、活性炭用量、脱色时间等条件下,测定了脱色效果和蛋白质损失率两项指标,以确定最佳的温度、pH、活性炭用量和脱色时间及脱色对小肽产率的影响。试验结果表明:在活性炭用量为4%,pH为4,温度为70℃,脱色时间为1.5h的条件下,猪血酶解液的脱色效果明显,而且脱色酶解液具有较高的小肽回收率。为了达找到小肽最好的分离提纯方法,探索膜技术在猪血红蛋白酶解小肽液的澄清和浓缩中的应用,试验研究了在膜分离过程中超滤膜的性能表征,以及酶解液过膜前后含氮物、血红素、氨基氮、粗肽成分的变化。实验结果表明:1000D超滤膜处理微滤液有较好的含氮物截留率。为了得到较好的小肽粉产品,研究了冷冻干燥技术在肽粉制备上的应用。为了测定小肽物质的性能,研究了凝胶电泳技术在测小肽分子量上的应用。
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