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血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle Cells, VSMCs)在局部环境的刺激下可从收缩表型向合成表型转化。血管损伤、氧化应激、炎症、血管紧张素Ⅱ(Angiotensinll, AngⅡ)及一些细胞因子的作用下可导致VSMCs从血管壁的中膜向内膜层迁移,并不断增殖和合成细胞外基质蛋白,使血管内膜增厚、血管腔变窄、血管弹性降低,最终导致动脉粥样硬化、高血压等心血管疾病的发生。谷胱苷肽S-转移酶(Glutathione S-Transferases, GSTs)是一组同工酶超家族,包括α、μ、π等亚型,能够催化还原型谷胱甘肽(GSH)上的硫原子与亲核攻击底物上的亲电子基团结合,从而参与降低胞内异源物质的亲核攻击。GSTp (GSTπ)是细胞中广泛存在的一种亚型,除了最基本的解毒作用,GSTp还通过蛋白和蛋白的直接结合影响细胞内应激激酶和其他信号分子的活性。最近有报导显示GSTm抑制刂VSMCs的增殖、迁移和氧化应激反应,提示了GSTp和GSTm可能通过抑制刂VSMCs的增殖对动脉粥样硬化的发生发展起调控作用。但是研究均未阐明GSTp是如何调控VSMCs增殖和生长的。本实验的目的是为了研究GSTp对VSMCs过度增殖和迁移的调控作用,并探讨其具体分子机理。实验采用的方法：1)分离培养大鼠血管平滑肌细胞,选取稳定生长的细胞进行脂质体转染,在VSMCs中过表达GSTp,并通过蛋白免疫印迹检测细胞内GSTp的表达情况；2)MTT、流式细胞仪及细胞划痕实验检测过表达GSTp对AngⅡ和PDGF引起的VSMCs增殖迁移的影响；3)蛋白免疫印迹检测过表达GSTp对JAK/STAT3信号通路的影响；4)通过RNA干扰的方式下调细胞内GSTp的表达,检测JAK/STAT3信号通路激活情况以及对细胞周期的影响。结果显示：1)用脂质体瞬时转染Xpress-GSTp真核质粒进入细胞内并成功表达,而且GSTp的表达量随着转染的质粒浓度的增高而上升。2)在AngⅡ或PDGF的刺激下,VSMCs表现出了显著的增殖作用,细胞周期从G0/G1进入到S期,且细胞迁移作用明显,而过表达GSTp能够显著性地抑制了VSMCs的增殖和迁移作用。3)AngⅡ作用下,VSMCs的JAK/STAT3信号通路快速激活,而过表达GSTp的细胞中JAK/STAT3磷酸化活性与对照组相比有显著的下降。4)蛋白免疫印迹结果表明,RNAi成功下调了细胞内GSTp的表达,干扰效率可达38%左右。而GSTp表达下调的细胞中,STAT3磷酸化活性有显著性的升高,并且细胞周期中S期的比例有大幅的上升。结论：GSTp能调控AngⅡ和PDGF引起的VSMCs增殖和迁移作用,GSTp调控细胞增殖的具体分子机理是通过抑制JAK/STAT3信号通路的激活而起到对细胞增殖和生长的调控作用。提示了GSTp作为胞内信号通路的调节蛋白对高血压、动脉粥样硬化等心血管疾病的发生与发展起到了非常的作用,也提示了GSTs基因多态性与心血管疾病的关系。