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自然条件下,几乎所有的兰科植物都与真菌形成共生关系,菌根真菌在兰科植物种子萌发和植株生长发育等生活史过程发挥着重要作用,掌握兰科植物菌根真菌多样性变化,对兰科植物保育及产业化都有重要意义。本研究选取分布于西双版纳基诺乡龙帕古茶园(CJ)、易武乡麻黑落水洞古茶园(CY)的兰科石斛属植物齿瓣石斛(Dendrob ium devonianum)为研究材料,分别于雾凉季(2014.12)、干热季(2015.04)、雨季(2015.08)采集成年植株根段,提取菌根总DNA,利用二代测序技术(Next Generation Sequencing Technology,NGS)对扩增出的真菌内转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,ITS)区域片段进行分子测序,分析不同季节条件下茶园内齿瓣石斛菌根真菌多样性变化,同时采集兜唇石斛(Dendrob ium aphyllum)、齿瓣石斛(D.devonianum)成年植株根段,利用单菌丝团分离法(Single Peleton Isolation Method)分离根部内生真菌,将所得到的内生真菌菌株与兜唇石斛、齿瓣石斛无菌播种幼苗进行共生培养实验,筛选能促进幼苗生长的有效共生真菌,主要结果如下: 1.ITS序列测定结果显示蜡壳菌目(Sebacinales)真菌为齿瓣石斛主要菌根真菌类群,角担菌科(Ceratobasidiaceae)、胶膜菌属(Tulasnella)等典型兰科菌根真菌在根中也有零星分布。除典型兰科菌根真菌,齿瓣石斛还可与Tomentella、丝盖伞菌属(Inocybe),革菌属(Thelephora)等外生菌根真菌类群形成共生关系。辛普森(Simpson)指数及反辛普森指数(Invsimpson)分析表明雾凉季CY、CJ菌根真菌多样性无显著性差异,而干热季、雨季CY菌根真菌多样性显著高于CJ; CY、CJ的齿瓣石斛菌根真菌多样性随生长季节转变呈现相似变化规律:干热季显著高于雨季、雾凉季,而雨季显著低于雾凉季。 2.从齿瓣石斛根中分离得到6株内生真菌菌株,菌株编号分别为FDdS-1、FDdS-2、FDdS-4、FDdS-5、FDdS-9、FDdS-12。从兜唇石斛根中分离得到10株内生真菌菌株,菌株编号分别为FDaS-1、FDaS-2、FDaS-3、FDaS-4、FDaS-5、FDaS-9、FDaS-10、FDaS-11、FDaS-12、FDaS-15。经分子鉴定菌株FDdS-5和FDdS-9分别和蜡壳菌属(Sebacina)的S.vermifera和S.sp.真菌相似度最高,而菌株FDdS-1、FDdS-2、FDdS-4和FDdS-12则分别和大伏革菌属(Phlebiopsis)的P.crassa、革菌属(Phanerochaete)的P.australis、多孔菌目(Polyporales)的一种真菌和酵母菌属(Meyerozyma)的一种真菌相似度最高。 3.通过共生培养实验,筛选出2株显著促进齿瓣石斛幼苗生长的菌根真菌:FDdS-5和FDdS-9。FDdS-5对齿瓣石斛的株高、鲜重、干重、茎粗和根数都有明显促进作用,而FDdS-9仅显著促进了齿瓣石斛幼苗株高的生长。显微观察发现,FDdS-5能在齿瓣石斛幼苗根部皮层形成菌丝团;而FDdS-9没有形成菌丝团结构。