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目的:研究新型银杏叶提取物GBE50对高脂血症大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用及对血管内皮细胞功能的影响,并从热休克蛋白HSP70和线粒体功能角度探讨GBE50对脑缺血预防和保护作用的药理作用机制.方法:1. GBE50对高脂大鼠MCAO模型的影响 雄性SD大鼠,体重(80±10)g时给予高营养饲料,体重增加至(250±20)g时进行实验,将这些大鼠随机分为7组.按Longa5分制评分标准对大鼠进行神经行为学评分:采用TTC染色法及ImageTool软件进行脑梗死体积测定;抗凝血进行血液流变学测定.观察GBE50对高脂血症大鼠脑缺血再灌注损伤后脑梗死体积、神经行为学及血液流变学的影响.2.GBE50对培养脑血管内皮细胞的影响 传代培养小鼠脑血管内皮细胞bEnd.3.以2.5mg/L的LPC为致内皮细胞损伤条件.LPC损伤前1 h,分别用含12.5、25、50、100、200 mg/L GBE50的无血清培养基预处理内皮细胞,加入LPC后置37℃、5﹪CO<,2>培养箱中继续培养23h.测定培养液LDH的含量反映细胞损伤程度,分别测定各组培养液NO和ET的含量及NOS、SOD、GSH-PPX活力,观察GBE50对血管内皮细胞的作用.3.GBE50保护作用的机制研究 3.1免疫组化法测定脑组织HSP70蛋白的表达.3.2 Clark氧电极法测定线粒体呼吸功能.结论:1.GBE50可明显减小高脂血症大鼠MCAO缺血再灌注后脑梗死体积,改善神经行为学评分及血液流变学指标.从整体动物水平证明了GBE50对脑缺血再灌注损伤的保护作用.2.GBE50可以改善LPC引起的脑血管内皮细胞损伤,增加内皮细胞NO分泌,降低ET分泌,升高eNOS活性而降低iNOS活性,并能提高GSH-PX和SOD活性,对内皮细胞产生保护作用,从而可能防止动脉粥样硬化的发生,降低脑缺血的发生率,提示GBE50可能有防治动脉粥样硬化的作用.3.GBE50可以提高高脂血症大鼠MCAO缺血再灌注后脑组织HSP70蛋白的表达,并可以改善H<,2>O<,2>引起的脑线粒体氧化应激损伤所致的呼吸功能障碍,增加线粒体呼吸Ⅲ态和RCR.提示GBE50可以通过提高脑缺血时HSP70的表达和保护线粒体呼吸功能而产生抗脑缺血损伤的保护作用.