论文部分内容阅读
目的：1.建立脾胃气滞小鼠模型，为研究促胃肠动力中药作用机制提供一个良好的实验平台。2.探讨槟榔对甘草诱导的脾胃气滞小鼠模型胃肠道组织中Cajal间质细胞的(ICC)形态、结构、分布及其与肠神经系统关系的影响。3.观察槟榔对脾胃气滞模型小鼠胃肠道ICC及一氧化氮(NO)的影响，探讨槟榔促胃肠动力的作用机制。方法：1.建立脾胃气滞小鼠模型：清洁级ICR小鼠60只，随机分为对照(NS)组和5个甘草(GC)组，每组10只，实验组分别给予不同浓度(5、10、15、20、25g/kg)的甘草溶液灌胃，NS组小鼠给予等体积生理盐水灌胃，共10d。每天分别记录六组小鼠日平均进食量及饮水量，并予以酚红法测定各组小鼠小肠推进率和胃排空率。2.清洁级ICR小鼠60只，随机分为2组：正常对照NS组15只，脾胃气滞组45只；脾胃气滞组造模后再随机分为模型对照GC组、槟榔(BL)组及莫沙必利(MS)组，每组15只。NS组、GC组、BL组及MS组每天分别给予等体积的生理盐水、生理盐水、槟榔溶液(5g/kg)及莫沙必利溶液(0.4mg/kg)灌胃，15d后用透射电镜观察各组结肠组织中ICC的形态、结构、数量、分布及其与肠神经系统的关系。3.清洁级ICR小鼠60只，随机分为2组：正常对照NS组15只，脾胃气滞组45只；脾胃气滞组造模后再随机分为对照GC组、BL组及Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)组，每组15只。NS组、GC组、BL组及L-NAME组每天分别给予等体积的生理盐水、生理盐水、槟榔溶液(5g/kg)及N~ω-硝基-L-精氨酸甲酯溶液(3mg/kg)灌胃，15d后用免疫组化法观察各组结肠ICC阳性(c-kit~+)及神经型一氧化氮合成酶阳性(nNOS~+)细胞的面积变化。结果：1. GC较小剂量组对小鼠日平均进食量、饮水量、小肠推进和胃排空有一定程度的抑制作用；GC较大剂量组则有一定程度的促进作用。其中5、10、25g/kg剂量组日平均进食量及小肠推进率与NS组比较差异有统计学意义(P<0.05)；5、10g/kg剂量组日平均饮水量与NS组比较差异有统计学意义(P<0.05)；5、20、25g/kg剂量组胃排空率与NS组比较差异有统计学意义(P<0.05)。2. NS组结肠组织ICC主要结构特点：细胞呈类纺锤状，有巨大的卵圆形核及向外延伸的长突起，胞质内有丰富的线粒体、滑面内质网和粗面内质网；GC组与NS组相比：ICC向外延伸的突起变短小，胞浆和细胞器明显减少，线粒体嵴模糊不清，内质网肿胀扩张，细胞核膜不完整；BL组、MS组与NS组相比：ICC向外伸展的突起变长，胞质内线粒体、内质网及核糖体增多。NS组环肌层和纵肌层内ICC与肠肌间神经元之间形成突触样连接，ICC突起包裹围绕神经纤维；GC组小鼠结肠组织中ICC与附近的肠肌间神经元轴突间突触样连接遭破坏，神经纤维结构变的模糊不清；而BL组及MS组小鼠结肠组织内ICC与周围的肠肌间神经元轴突间突触样连接增多。3.小鼠结肠组织c-kit~+细胞面积：与NS组相比，GC组和L-NAME组小鼠结肠组织c-kit~+细胞面积明显减少(P<0.01)；与GC组相比，BL组小鼠结肠组织c-kit~+细胞面积明显增加(P<0.01)。小鼠结肠组织nNOS~+细胞面积：与NS组相比， L-NAME组小鼠结肠组织nNOS~+细胞面积明显减少(P<0.01)；与GC组相比，L-NAME组小鼠结肠组织nNOS~+细胞面积明显减少(P <0.01)。结论：1.5g/kg剂量甘草诱导的脾胃气滞小鼠模型日平均进食量、饮水量较对照组减少，小肠推进和胃排空较对照组减慢，基本符合脾胃气滞证临床及病理生理学特征。2. ICC具有独特的超微结构，改变其与肠肌间神经系统解剖或结构上的特殊关系可能是槟榔调节胃肠功能的基础。3.槟榔对甘草诱导的脾胃气滞小鼠受损的ICC有修复作用，这可能是槟榔能促进胃肠动力作用的机制之一。