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目的:采用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)方法检测WT1基因在急性白血病患儿外周血和骨髓中的表达,探讨WT1基因在检测微小残留病(minimal residual disease,MRD)中的价值。方法:采用实时荧光定量PCR方法,检测23例初治急性白血病患儿、80例次完全缓解患儿外周血及骨髓中WT1基因的表达水平,以10例非肿瘤患儿为正常对照;流式细胞术检测MRD,并同时观察白血病患儿疾病状态。23例初治急性白血病患儿包括16例急性淋巴细胞白血病(ALL)及7例急性粒细胞白血病(AML),其中初治ALL组于治疗前、治疗第15天、33天及3个月,初治AML组于治疗前、治疗第15天、1个月、3个月分别采集外周血和骨髓标本,检测WT1表达。80例次完全缓解组患儿(ALL56例次,AML24例次)于治疗第3个月、6个月及12个月分别采集外周血和骨髓检测WT1表达阳性率。结果:1、正常对照组儿童外周血及骨髓WT1表达阳性率均为0,初治白血病组患儿外周血及骨髓WT1表达阳性率均为65.2%,初治白血病组外周血及骨髓WT1的表达均明显高于正常对照组(p=0.001)。ALL和AML外周血WT1表达阳性率比较,骨髓WT1表达阳性率比较,差异均无统计学意义(p=0.533)。完全缓解患儿治疗第3个月、6个月外周血及骨髓WT1表达阳性率明显高于第12个月(p均<0.05)。2、初治ALL患儿治疗前、治疗第15天、33天及3个月外周血WT1表达量分别为0.53±0.14、0.24±0.13、0.18±0.05、0.15±0.11,各组间差异具有统计学意义(F=24.68,p<0.001);治疗第15天、33天及3个月WT1表达量明显低于治疗前(p均<0.05),第15天、33天及3个月两两比较,差异均无统计学意义(p>0.05)。初治ALL患儿治疗前、15天、33天及3个月骨髓WT1表达量分别为0.72±0.14、0.16±0.06、0.12±0.02、0.12±0.05,各组间差异具有统计学意义(F=135.27,p<0.001),治疗第15天、33天及3个月WT1表达量明显低于治疗前(p均<0.05)。治疗第15天、33天及3个月两两比较,差异均无统计学意义(p>0.05)所有初治ALL患儿皆于33天达完全缓解。3、初治AML患儿治疗前、15天、1个月及3个月外周血WT1表达量分别为0.70±0.07、0.20±0.06、0.18±0.05、0.15±0.06,各组间差异具有统计学意义(F=139.29,p<0.001),治疗第15天、33天及3个月WT1表达量明显低于治疗前(p均<0.05)治疗第15天、33天及3个月两两比较,差异均无统计学意义(p>0.05)。初治AML患儿治疗前、治疗第15天、1个月及3个月患儿骨髓WT1表达量分别为0.87±0.04、0.24±0.05、0.21±0.05、0.18±0.10,各组间差异具有统计学意义(F=241.29,p<0.001),治疗第15天、33天及3个月WT1表达量明显低于治疗前(p均<0.05)。治疗第15天、33天及3个月两两比较,差异均无统计学意义(p>0.05)。全部初治AML患儿皆于1~2个月内获得完全缓解。4、初治ALL患儿外周血WTl表达量与MRD成正相关,(r=0.999,p<0.001);初治ALL患儿骨髓WT1表达量与MRD成正相关(r=0.997,p<0.001)。5、3例复发白血病患儿复发前3个月WT1水平上升。结论:1、实时荧光定量PCR方法检测白血病患儿WTl表达简便易行、准确性高、特异性好。2.WT1基因在非肿瘤儿童外周血及骨髓均不表达,而在急性白血病治疗前高表达。3.初治急性白血病患儿诱导缓解化疗后WT1表达水平明显低于初治时。4.WT1阳性率随着治疗时间的延长明显下降。5.ALL患儿外周血及骨髓中WT1表达量与流式细胞仪检测的MRD呈正相关。对急性白血病患儿外周血及骨髓中WT1基因表达进行定量分析,可用于MRD的监测。