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目的:根据“肾藏精生髓主骨”的理论,采用补肾中药有效成分诱导骨髓间充质干细胞成骨分化;以阐明补肾中药防治骨质疏松症的作用机理,进一步为“肾藏精生髓主骨”脏象理论提供实验依据。材料与方法:随机将SPF级SD雌性大鼠分为正常对照组、阳性对照组(转化液组)、补肾配伍组第1组(淫羊藿苷低剂量、补骨脂素低剂量、齐墩果酸低剂量、二苯乙烯苷低剂量)、补肾配伍第2组(淫羊藿苷低剂量、补骨脂素中剂量、齐墩果酸中剂量、二苯乙烯苷中剂量)、补肾配伍第3组(淫羊藿苷低剂量、补骨脂素高剂量、齐墩果酸高剂量、二苯乙烯苷高剂量)、补肾配伍第4组(淫羊藿苷中剂量、补骨脂素低剂量、齐墩果酸中剂量、二苯乙烯苷高剂量)、补肾配伍第5组((淫羊藿苷中剂量、补骨脂素中剂量、齐墩果酸高剂量、二苯乙烯苷低剂量)、补肾配伍第6组(淫羊藿苷中剂量、补骨脂素高剂量、齐墩果酸低剂量、二苯乙烯苷中剂量)、补肾配伍第7组(淫羊藿苷高剂量、补骨脂素低剂量、齐墩果酸高剂量、二苯乙烯苷中剂量)、补肾配伍第8组(淫羊藿苷高剂量、补骨脂素中剂量、齐墩果酸低剂量、二苯乙烯苷高剂量)、补肾配伍第9组(淫羊藿苷高剂量、补骨脂素高剂量、齐墩果酸中剂量、二苯乙烯苷低剂量)、非补肾药对照组(黄芪甲苷组、川芎嗪组);通过血清药理学方法,对实验大鼠连续灌胃给药3天后,取材(取含药血清),使用各组大鼠含药血清培养骨髓间充质干细胞6天、12天、18天;用茜素红染色对钙化结节进行成骨细胞鉴定;应用MTT法检测骨髓间充质干细胞的增殖率,并用ELISA法检测成骨细胞中碱性磷酸酶(Alkaline phosphates,ALP)、骨钙素(Osteocalcin,BGP)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein,BMP-2)的活性表达及含量,用实时定量PCR法检测氨基末端激酶(1N-terminal kinase1,JNK1)的基因表达。结果:1.补肾中药有效成分含药血清作用于体外培养骨髓间充质干细胞72h,可以促进骨髓间充质干细胞的增殖。2.成骨细胞的染色结果:钙化结节可成大片红色,多数分布于细胞密集处。阴性对照则无红色,颜色与之前无改变。3.成骨细胞ALP活性、BGP含量、BMP-2含量在6天、12天、18天检测结果中,12天达到高峰值。其结果是:12天成骨细胞ALP酶联免疫结果:与正常对照组比较,补肾中药配伍共9组、阳性对照组(转化液组)和黄芪甲苷组均明显增加,存在显著性差异(P<0.01);与阳性对照组比较,补肾中药配伍组中第5组、6组、8组、9组均明显增大(P<0.01);与非补肾中药组比较,补肾中药配伍组第3组、4组、5组、6组、7组、8组、9组OD值均明显高于黄芪甲苷组和川芎嗪组,存在显著性差异(P<0.01);补肾中药配伍组之间比较,5组、6组、9组OD值均明显高于其它组,存在显著性差异(P<0.01)。12天成骨细胞BGP酶联免疫结果:与正常对照组比较,补肾中药配伍组共9组和阳性对照组(转化液组)OD值均明显增加,存在显著性差异(P<0.01);与阳性对照组比较,补肾中药配伍组中第6组、9组OD值均明显增加(P<0.01);与非补肾中药组比较,补肾中药配伍组(正交设计共9组)OD值均明显高于黄芪甲苷组和川芎嗪组,存在显著性差异(P<0.01);补肾中药配伍组之间比较,第5组、6组、9组OD值明显高于其它组,存在显著性差异(P<0.01)。12天成骨细胞BMP-2酶联免疫结果:与正常对照组比较,补肾中药配伍组共9组和阳性对照组(转化液组)、非补肾中药黄芪甲苷组和川芎嗪组OD值均明显增加,存在显著性差异(P<0.01);与阳性对照组比较,补肾中药配伍组中第5组、6组OD值均明显增加(P<0.01);与非补肾中药比较,补肾中药配伍组第3组、4组、5组、6组、7组、8组、9组OD值均明显高于黄芪甲苷组和川芎嗪组,存在显著性差异(P<0.01);,补肾中药配伍组之间比较,第5组、6组、9组)OD值均明显增加,存在显著性差异(P<0.01)。4.JNK1:Real-Time PCR结果显示:补肾中药诱导骨髓间充质干细胞成骨分化实验中,与正常对照组比较,补肾中药配伍组共9组和阳性对照组(转化液组)、非补肾中药对照组表达水平均明显增加,存在显著性差异(P<0.01);与阳性对照组比较,补肾中药配伍组共9组、非补肾中药组(黄芪甲苷组、川芎嗪组)表达水平明显增加(P<0.01);与非补肾中药川芎嗪组比较,补肾中药配伍组(第4组)表达水平明显增加,存在显著性差异(P<0.01);与黄芪甲苷组比较,补肾中药配伍组中(第4组、5组)表达水平明显增加,存在显著性差异(P<0.01)。结论:1.补肾中药有效成分能促进骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞,提高骨髓间充质干细胞增殖率和成骨细胞的增殖分化。2.骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的机理与JNK1信号通路相关。补肾中药有效成分能上调JNK1的基因表达。