孢子丝菌病是双相型真菌申克孢子丝菌所致的皮肤,皮下组织及其附近淋巴管的亚急性和慢性感染,主要累及四肢和颜面等暴露部位,表现为肉芽组织损害,偶尔累及黏膜、肺、脑膜和其他内脏器官。孢子丝菌是腐生真菌,在世界广泛分布,可污染土壤、芦苇、动物的皮毛、污水等。人类常因外伤直接接种致病。申克孢子丝菌为双相型真菌,室温培养为菌丝相,组织内和37℃培养为酵母相。其酵母相能引起上述皮肤、皮下组织、黏膜和局部淋巴系统甚至全身多系统的损害,而菌丝相则不会。这种双相真菌的致病性和其双相型的转换密切相关。目前,对于孢子丝菌双相转换与致病蛋白二者关系的研究尚未见报道,而其他双相真菌在这方面的研究有很多报道,很多蛋白被推测及鉴定出来。研究均证实了在酵母相中有差异蛋白的高表达,通过比较,我们课题组将进一步研究申克氏孢子丝菌双相转换中差异蛋白的表达情况,并寻找出在其诱导转换机制扮演重要角色的蛋白质。目的：筛选孢子丝菌菌丝相酵母相差异蛋白,寻找有关双相转换的致病蛋白,为明确孢子丝菌的发病机理及寻找靶向治疗药物奠定重要的基础。材料和方法：对孢子丝菌标准株分别进行菌丝相和酵母相的培养,并提取其各自的总蛋白,纯化。并找出适合孢子丝菌蛋白双相电泳的条件,进行蛋白的分离,得出相关的蛋白图谱,经Pdquest软件分析,选取相关的差异蛋白经处理后进行质谱检测,最后得到相关的具体的蛋白。结果：1、申克氏孢子丝菌25℃之后,在光镜下可见到细长的菌丝体,转入BHI培养基37℃培养24小时后菌体断裂,48小时时完全变成单个孢子。2、在进行孢子丝菌双向电泳时,选择蛋白上样为50μg,载体两性电解质PH：4-6,经2D clean-Up Kit充分纯化并行考马斯亮蓝染色可获得清晰的蛋白质双向电泳图谱,适用于蛋白质组学研究。3、孢子丝菌蛋白双向电泳结果测得差异蛋白300多个,其中酵母相高表达的200多个,低表达的100多个。4、经质谱分析及NCBI数据库检索得到可能有意义的蛋白：DRK1组氨酸激酶,热休克蛋白77伴88,肌动蛋白,细胞色素P-450,苏／丝氨酸激酶等以及一些假想蛋白。结论：1、孢子丝菌确实有在随温度变化而出现形态转化,25℃为菌丝相,37℃为酵母相。2、蛋白上样量、纯化方法、载体两性电解质PH选择范围,染色方法均影响双向电泳的结果。3、建立了孢子丝菌菌丝相酵母相的双向电泳图谱。4、获得5个可能致病蛋白：Hsp70伴Hsp88,SIR2家族组蛋白脱乙酰基酶,DRK1组氨酸激酶,苏／丝氨酸蛋白激酶和磷脂酰肌醇3-激酶。