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本文分三个部分进行探讨。 第一部分:DMRT1在SD大鼠骨髓间充质干细胞中的表达 目的:检测DMRT1在SD大鼠各种组织中的表达,明确其在SD大鼠骨髓间充质干细胞中的表达。 方法:通过PCR检测DMRT1在SD大鼠肝、脾、肾、睾丸和骨髓间充质干细胞中的表达情况;运用免疫荧光技术检测DMRT1在骨髓间充质干细胞中的表达。 结果:DMRT1表达于SD大鼠睾丸和骨髓间充质干细胞中。 结论:DMRT1不仅表达于大鼠睾丸组织中,而且还在大鼠骨髓间充质干细胞中表达。 第二部分:DMRT1在SD大鼠骨髓间充质干细胞中的表达调控 目的:检测卵泡刺激素和佛波酯分别处理后的骨髓间充质干细胞中DMRT1的表达情况。 方法:用卵泡刺激素和佛波酯分别作用于骨髓间充质干细胞,采用RT-PCR来检测处理之后的DMRT1表达情况。 结果:用卵泡刺激素处理后的骨髓间充质干细胞中DMRT1的表达明显高于处理前的对照组(P<0.05);用佛波酯处理后的骨髓间充质干细胞中DMRT1的表达明显低于处理前的对照组(P<0.05)。 结论:卵泡刺激素和佛波酯对骨髓间充质干细胞中DMRT1的表达有调控作用。卵泡刺激素促进DMRT1的表达,而佛波酯使DMRT1的表达降低。 第三部分:DMRT1表达调控在SD大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化中的作用 目的:研究SD大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)诱导分化过程中DMRT1与视黄酸和Stra8的关系。 方法:选取rBMSCs第三代细胞(P3),将实验分为对照组、全反式视黄酸诱导组、全反式视黄酸和卵泡刺激素处理组以及全反式视黄酸和佛波酯处理组,诱导细胞至7天和21天,用RT-PCR检测DMRT1和Stra8的表达,分析其mRNA的表达量的变化,从而寻求两者之间的关系。 结果:在第7天和21天,全反式视黄酸和卵泡刺激素处理组中DMRT1的表达明显 高于全反式视黄酸诱导组(P<0.05);全反式视黄酸和佛波酯处理组中DMRT1的表达明显低于全反式视黄酸诱导组(P<0.05)。对照组以及全反式视黄酸和卵泡刺激素处理组中Stra8没有表达;全反式视黄酸和佛波酯处理组中Stra8的表达明显高于全反式视黄酸诱导组(P<0.05)。 结论:DMRT1的表达量变化引起Stra8的表达量变化,DMRT1高表达时,Stra8表达量降低或不表达;DMRT1低表达时,Stra8表达量增高。这一结果表明在ATRA诱导骨髓间充质干细胞分化过程中,DMRT1抑制Stra8的表达。