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芍药(Paeonia lactiflora Pall.)是芍药科芍药属的多年生草本植物,具有极高的观赏价值和药用价值。芍药传统分株繁殖方式存在繁殖周期长、繁殖系数低等问题,不能满足人们对其产量的需求;组织培养技术能在短时间内繁殖较多的后代且保持亲本原有的优良性状,是加快芍药优良品种商业化进程的重要手段;但芍药组织培养技术中存在污染率高、褐化率高、生根移栽困难等问题,严重阻碍了芍药组织培养进程的发展。本试验以‘蓝田飘香’、‘凤羽落金池’、‘紫芙蓉’、‘春晓’等四个品种为对象,对芍药组织培养无菌体系的建立进行了研究;以‘紫芙蓉’为主对丛生芽的诱导与增殖进行了研究;以‘蓝田飘香’为主对愈伤组织诱导与分化以及褐化现象的克服等四个方面进行了研究。研究结果表明:(1)芍药的地下芽培养应该选取生长健壮饱满的、直径为1~2cm大小的地下芽,用HgCl2消毒处理以8min为宜,对鳞片包裹紧实地下芽进行消毒处理时要剥去外面数层鳞片且至少保留2层鳞片,芍药地下芽以一步灭菌法为宜,太多的处理增加了其感染细菌的概率且无法保证灭菌彻底;(2)‘紫芙蓉’地下芽启动培养表现最好,添加GA3能促进地下芽萌发,‘紫芙蓉’最佳丛生芽诱导培养基为1/2MS(Ca2+口倍)+GA30.5mg/L+6-BA1.0mg/L+IAAO.1mg/L;最佳增殖培养基为1/2MS(Ca2+加倍)+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L;诱导‘蓝田飘香’带芽茎段产生腋芽最佳培养基组合为1/2MS(Ca2+加倍)+GA30.5mg/L+TDZO.5mg/L+IAAO.1mg/L;(3)‘蓝田飘香’愈伤组织诱导率最高,最佳叶片愈伤组织诱导组合为1/2MS(Ca2+加倍)+6-BA0.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.2mg/L,最佳茎段愈伤组织诱导组合为1/2MS(Ca2+加倍)+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.2mg/L+TDZ0.5mg/L+NAA0.2mg/L,愈伤组织最佳增殖培养基为l/2MS(Ca2+口倍)+TDZ0.5mg/L+2,4-D0.5mg/L;利用芍药叶片、茎段、叶柄及完整植株基部诱导产生的愈伤组织均未分化出不定芽。(4)对‘蓝田飘香’叶片、地下芽、愈伤组织进行切割后24h将其转移到新鲜培养基上,能分别将其因褐化导致的死亡率降低17.67%、36.88%、13.34%;其体内多酚氧化酶(PPO)活性在24h内的变化趋势为先升高后降低,次日恢复受伤前水平。