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京尼平是中药栀子中的活性成分,具有保肝利胆、降压、抗血栓等多种药效,并且是一种新兴生物交联剂。本文进行了固定化β-葡萄糖苷酶转化京尼平苷制备京尼平的研究。
本文以海藻酸钠为载体,用交联-包埋法对β-葡萄糖苷酶进行固定化。研究了游离β-葡萄糖苷酶和固定化β-葡萄糖苷酶的酶学性质,游离β-葡萄糖苷酶与固定化β-葡萄糖苷酶的最适反应温度分别为50℃和55℃,反应最适pH值均为4.5。通过同定化有效地提高了酶的耐热性,并减小了反应pH值变化对酶活力的影响。
本文采用了水和乙酸乙酯组成的两相体系进行酶催化反应,在反应的同时将京尼平从水相中萃取到乙酸乙酯相,减少了京尼平自身的水解反应和副产物的生成。研究得出最佳反应条件:固定化β-葡萄糖苷酶在pH4.5的醋酸缓冲液和乙酸乙酯组成的两相体系中水解京尼平苷,反应温度为55℃,反应时间为2.5h。固定化酶能有效地回收利用并长时间使用,且具有良好的反应稳定性。
本文建立的京尼平制备方法简单易行,生产周期短,产品品质佳,并且有效地解决了酶无法回收利用的问题,降低了生产成本,同时也使得产物的分离纯化更易进行,为京尼平的工业生产奠定了基础。