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目的:建立稳定的人非小细胞肺癌骨转移动物模型,研究和探讨芪蔹方用于治疗非小细胞肺癌骨转移的可行性和相关机制,进一步为支持中医药用于治疗非小细胞肺癌骨转移提供证据。 方法:实验一:优化建立稳定非小细胞肺癌骨转移动物模型的步骤,操作方式为胫骨内注射人非小细胞肺癌细胞株造模法,运用PI3K抑制剂NVP-BKM120进行干预并与对照组进行对比,通过对多种细胞株的筛选、造模细胞浓度的调整、造模后起始给药时间、起始观察时间的调整,对模型成功率及稳定性、可重复性的分析,最终通过microPET/CT和microSPECT/CT对模型的成功与否进行客观评价,同时探讨两种成像方式的联合使用对骨转移的诊断价值。 实验二:基于实验一建立的稳定实验动物模型,造模后首先应用小动物活体成像系统判断成功,再根据模型体重采用随机数字法随机分为治疗组和对照组,造模一周后治疗组给予芪蔹方灌胃干预,对照组给予相同剂量的生理盐水灌胃,观察三周,每周行活体成像系统定量分析肿瘤活性;四足承重系统分析活动行为;记录瘤体体积,裸鼠重量的一般资料,三周后取胫骨行MicroCT分析骨质破坏情况,取瘤体经流式细胞分析仪分析凋亡分布,取瘤体行Western Blot分析凋亡通路,取血清分析血清碱性磷酸酶、钙、磷的变化。 结果:实验一:1)通过不断调整造模步骤建立起一个稳定的非小细胞肺癌骨转移模型,造模成功率为100%;2)其操作方法简便,模型可重复性高;3)通过对模型行为学的观测和对靶病灶靶器官的病理观察,认为模型可以模拟非小细胞肺癌四肢长骨转移的行为特征和病理变化。 实验二:芪蔹组对比对照组:能显著抑制肿瘤生长(瘤径:p=0.031;活体成像:p=0.034);促进肿瘤细胞凋亡(早期凋亡p=0.000,凋亡通路: Caspase3 p=0.008);减少骨质破坏(骨小梁数目:p=0.034;骨皮质厚度:p=0.001:骨容积p=0.025),减轻对患肢活动能力的影响(四足承重:p=0.001);降低血清ALP浓度(p=0.004)。 结论:1)小鼠胫骨内注射法制作非小细胞肺癌骨转移小鼠模型是成熟的。 2)芪蔹方可以体内促进细胞凋亡从而抑制肿瘤生长。 3)芪蔹方可以抑制破骨细胞形成,减少骨质破坏,但也可能是通过抑制肿瘤生长起到骨质保护作用。 4)芪蔹方作用于非小细胞肺癌骨转移模型可能通过减轻瘤体负荷在行为学上起到减轻活动障碍的作用。