出血性休克时血液循环中β-内啡肽含量剧增,因而长期以来纳洛酮是休克的治疗措施之一,但其疗效随给药途径和实验对象不同而变化,因此阿片受体拮抗剂在休克救治中并未得到广泛应用。近年有研究表明,δ受体激动剂用于出血性休克可升高血压、延长存活时间。在神经中枢和外周有δ₁和δ₂两种受体亚型,究竟激动何种亚型有心肌保护作用尚不清楚。线粒体通透性转换孔（Mitochondrial Permeability Transition Pore,mPTP）是线粒体内、外膜之间的非特异性通道,在再灌注早期开放,可以诱导细胞凋亡。研究发现mPTP在缺血后处理（Ischemic Postconditioning,IPost）对心肌的保护作用中扮演着重要角色,可能是IPost保护机制的共同通路,然而mPTP在阿片类药物后处理中的作用如何,仍需进一步的研究。本研究利用大鼠出血性休克模型监测休克后复苏开始时给予阿片δ₁和δ₂受体激动剂后血压和心功能的变化,并通过心肌组织病理学和mPTP的变化,探讨阿片δ受体激动剂对出血性休克大鼠心肌的保护作用及可能机制,为出血性休克的心肌保护提供理论依据,为出血性休克的救治提供一条新思路。第一部分阿片δ₁受体激动剂对急性出血性休克大鼠心肌保护的研究方法1.成年雄性SD大鼠体重250-300g,随机分成四组（n=6）:NS组、TAN-67组、BNTX组和BNTX+TAN-67组。大鼠经腹腔注射3%戊巴比妥钠30mg/kg麻醉后固定。气管切开插管,保留自主呼吸。分离股动脉和颈动脉,插入用肝素水冲洗过的聚乙烯管,经测压换能器与智能多导生理监护仪相连,监测心率（Heart Rate,HR）,平均动脉压（Mean Arterial Pressure,MAP）、左心室压力（Left Ventricular Pressure,LVP）、左心室压力最大上升速率（The Maximal Left Ventricular Pressure Rise Ratio,+dp/dtmax）和左心室压力最大下降速率（The Maximal Left Ventricular Pressure Decrease Ratio,-dp/dtmax）。插管后给予3mg/kg肝素。稳定15min后经股动脉插管放血制作出血性休克动物模型,按照改良Wiggers法,10min内使MAP降至约40mmHg,根据血压波动情况适量回输血液或再放血维持MAP在40mmHg左右,达到休克状态后维持60min,然后经颈静脉插管给药,之后回输自体血复苏,观察120min。全程持续监测HR、MAP、LVP和±dp/dt_max。2.实验结束后开胸取左心室前乳头肌根部1mm×1mm×1mm心肌组织,常规制备电镜标本,JEM-2000EX透射电镜下观察心肌组织超微结构。3.依据Flameng线粒体半定量分析法,检测线粒体损伤程度。4. mPTP活性的检测:心肌匀浆后,低温梯度离心,提取线粒体。比色法检测540nm处吸光度的变化,观察mPTP开放/关闭情况。结果1.阿片δ₁受体激动剂（TAN-67）复苏后MAP和心功能指标与对照组（NS）比较,均升高（P<0.05）,阿片δ₁受体拮抗剂（BNTX）组各项指标与对照组无显著差异（P>0.05）。2. TAN-67处理后的心肌超微结构保存较NS明显改善,BNTX不但无保护效应,单独应用BNTX可加重心肌损伤。3. TAN-67组的线粒体损伤评分较NS组减小（P<0.05）,并在单独应用BNTX时线粒体损伤加重。4. TAN-67组的A540改变值与NS组比较,明显减小（P<0.05）,提示TAN-67有效抑制了心肌mPTP开放,BNTX可抵消其抑制作用,同时单独应用BNTX组mPTP开放增加（P<0.05）。第二部分阿片δ₂受体激动剂对急性出血性休克大鼠心肌保护的研究方法1.成年雄性SD大鼠24只,体重250-300g,随机分成四组（n=6）:DMSO组、DeltorpinⅡ组、NTB组和NTB+DeltorpinⅡ组。按照第一部分的方法制作大鼠出血性休克模型,并监测各项血流动力学指标。2.实验结束后制备心肌电镜标本,观察心肌组织超微结构。进行线粒体损伤评分。3.检测mPTP活性。结果1.复苏开始前给予阿片δ₂受体激动剂DeltorpinⅡ明显改善复苏后MAP和心功能指标,与对照组（DMSO）比较P<0.05。阿片δ₂受体拮抗剂NTB可抵消其保护效应。2. DeltorpinⅡ处理后的心肌超微结构观察明显好于DMSO组,NTB可抵消DeltorpinⅡ保护效应,且单独应用NTB心肌损伤更加严重。3. DeltorpinⅡ组的线粒体损伤评分较DMSO组减小（P<0.05）,单独应用NTB时线粒体损伤加重（P<0.05）。4. DeltorpinⅡ组的A540改变值明显小于DMSO组（P<0.05）,提示DeltorpinⅡ抑制心肌mPTP开放,NTB可抵消DeltorpinⅡ抑制mPTP开放的作用。单独应用NTB时mPTP开放程度明显增加（P<0.05）。结论1.复苏前给予阿片δ₁受体激动剂TAN-67和δ₂受体激动剂DeltorpinⅡ均能改善急性出血性休克大鼠复苏后的血流动力学指标。在液体复苏的基础上,复苏前给予TAN-67和DeltorpinⅡ可明显改善急性出血性休克的复苏效果。2.复苏前给予阿片δ₁受体激动剂TAN-67和δ₂受体激动剂DeltorpinⅡ能保护心肌细胞和线粒体结构,减轻心肌缺血/再灌注（Ischemia/Reperfusion,I/R）损伤。3.复苏前给予阿片δ₁受体激动剂TAN-67和δ₂受体激动剂DeltorpinⅡ的心肌保护作用与TAN-67和DeltorpinⅡ抑制再灌注早期mPTP开放有关。