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目的Klotho基因是已知与衰老及代谢相关的基因，同时对衰老相关的疾病如高血压、冠心病等也有一定关系。已有研究表明糖尿病的发病与Klotho信号作用的减弱明显相关，病情程度与Klotho信号强度减弱程度成正相关。Klotho基因在胰岛素和IGF-1信号通路中起到重要调节作用，糖尿病则与心血管疾病有明显相关性。研究发现Klotho基因表达缺陷的小鼠会出现与人类衰老相关疾病表型，如动脉硬化、骨质疏松、糖及能量代谢异常等，提示Klotho基因表达调节可能在人类代谢综合征的发生、发展中起作用。国外研究证实在动脉粥样硬化模型小鼠导入Klotho基因，其血管内皮功能的异常得到改善，一氧化氮的产量增加，已升高的血压降低，动脉中层钙化和周围血管的纤维化减轻，并且有抑制高血压的进一步发展和继发性靶器官损害的作用。提示Klotho基因对冠状动脉的保护作用。本研究旨在对糖尿病大鼠进行Klotho基因导入，观察比较基因导入后对大鼠血高、低密度脂蛋白、i一氧化氮合酶、P-选择素、水平的影响,为进一步研究Klotho基因对冠心病的保护作用做准备。方法首先进行Klotho基因的克隆和Klotho载体构建：提取大鼠RNA,进行反转录并构建完整基因，根据Klotho基因序列时机引物，应用PCR技术扩增目的基因，构建Klotho载体；而后建立糖尿病大鼠动物模型，将Klotho基因导入糖尿病大鼠体内，实时定量RT-PCR,Western bolt蛋白免疫印迹等技术测定实验组和对照组Klotho基因mRNA和蛋白表达水平，判定Klotho基因导入效果；造模成功后12周处死模型动物，测定Klotho基因mRNA和蛋白表达水平，并检测血低密度脂蛋白，高密度脂蛋白，一氧化氮合酶（Nos）、P-选择素含量。结果糖尿病大鼠Klotho基因治疗组高密度脂蛋白为（0.61±0.06） mmol/L，阴性载体对照组为（0.48±0.11）mmol/L，正常大鼠高密度脂蛋白为（0.67±0.06）mmol/L，经两独立样本的t检验结果P<0.05，有统计学意义，与正常组相比，结果降低；基因治疗组低密度脂蛋白为（0.44±0.09）mmol/L，阴性载体对照组为（0.45±0.10）mmol/L，正常非糖尿病大鼠组为（0.10±0.01）mmol/L,治疗组与对照组比P〉0.05，无统计学意义，与正常组比较，糖尿病各组低密度脂蛋白均明显升高；一氧化氮合酶基因治疗组的糖尿病模型大鼠浓度为（8.53±2.22）u/ml，阴性载体对照组为（11.24±4.22）u/ml，正常非糖尿病大鼠组为（2.51±1.02）u/ml，正常组与对照组比P<0.05，有统计学意义；P-选择素治疗组为（3.07±0.67）ng/mL，阴性载体对照组为（5.21±1.12）ng/mL，正常非糖尿病大鼠的浓度为（2.71±0.46）ng/mL，正常组与对照组比P<0.05,有统计学意义。结论通过实验发现，对于糖尿病大鼠，Klotho基因可使其高密度脂蛋白升高，并降低一氧化氮合酶的反应性增高程度，但对于低密度脂蛋白无明显影响，同时，Klotho基因可降低P-反应蛋白的增高水平，总体来说，Klotho基因对冠心病的危险因素具有一定的抑制作用，可保护动脉内膜。