【摘 要】
:
热激蛋白分子(HSPs)是一类具有高度保守性的分子,当机体受到热击等有害刺激时机体为保护自身稳定而表达的一类可诱导蛋白,在损伤蛋白的折叠与修复、细胞保护、抗凋亡以及疾病等
论文部分内容阅读
热激蛋白分子(HSPs)是一类具有高度保守性的分子,当机体受到热击等有害刺激时机体为保护自身稳定而表达的一类可诱导蛋白,在损伤蛋白的折叠与修复、细胞保护、抗凋亡以及疾病等方面有重要的作用。HSP60和HSP70是其中非常关键的两个成员,在生物体内发挥多种重要的功能,虽然对其结构和多种生理功能皆有研究,但是在组织再生过程中的作用研究很少,鱼鳍再生中更是寥寥数笔。本课题以适应性强、营养价值高的黄河泥鳅和大鳞副泥鳅为材料,采用RACE法克隆两种泥鳅再生尾鳍中的HSP60和HSP70全长序列,分析其序列结构;设计含酶切位点的ORF引物,克隆其开放阅读框,与pET-32a构建重组表达质粒,导入BL21表达菌株,诱导其表达重组目的蛋白;设计荧光定量引物,以GAPDH为内参基因,采用相对荧光Real-time PCR法分析两种泥鳅尾鳍再生过程中HSP60和HSP70的表达模式。用RACE法获得了两种泥鳅的HSP60和HSP70的全长序列,两种泥鳅HSP60基因ORF均为1728bp,推测编码576个氨基酸,分子量为61.051kD,理论等电点为4.75,其序列中含有HSP60家族中的GGM重复序列和AAVEEGIVPGGG标签序列,同源度和进化分析发现HSP60序列高度保守;两种泥鳅HSP70基因ORF均为1932bp,推测编码644个氨基酸,分子量为70.397kD,理论等电点为4.38,其序列中含有HSP70家族中的胞质标签EEVD及3个HSP70家族标签序列(分别是IDLGTTYS、IFDLGGGTFDVSIL以及IVLVGGSTRIPKIQK),同源度和进化分析发现两种泥鳅HSP70序列具有高度保守性。重组蛋白诱导表达后,SDS-PAGE电泳结果显示,泥鳅的两种重组蛋白分子量分别为78.9kD和88.3kD(含部分载体蛋白),经过温度梯度和IPTG浓度梯度优化,37℃、IPTG浓度为1mmoL、诱导表达6h为它们的最优表达条件。相对荧光Real-time PCR结果表明HSP60和HSP70参与了鱼鳍再生过程,再生过程中的作用可能与断面表皮细胞的形成以及芽基的形成相关,还可能与损伤蛋白的折叠、修复以及抗凋亡相关。
其他文献
白洋淀上游流域有6座大型水库,8座中型水库和129座小型水库,对区域控制与雄安新区防洪安全和水资源利用起至关作用。本文以中型水库为研究对象,依据长系列降雨和洪水资料,分析控制流域产、汇流规律,制定不同标准洪水的调控方案,为水库的安全运行和防洪减灾提供技术指标。主要研究结论如下:(1)通过对白洋淀上游水系基本状况的分析,明确了中型水库对白洋淀上游流域雨洪关系及蓄泄调控的重要性,在此基础上,搜集了龙潭
随着《中国制造2025纲领》发布,中国正在经历从一个制造大国向制造强国转型过程,中国制造将成为引领世界制造行业的新龙头。而智能物流是工业4.0核心组成部分。因此对于智能
近些年,随着科学技术的发展,出现了各种识别手势的设备和技术来满足不同人们的不同需求。但是,传统手势识别方法非常笨重,需要戴上数据手套;而计算机视觉技术需要目标在视线范围之内。本文提出的基于多模态的Wi-Fi信号手势识别技术对现有的手势识别研究在设备和技术这两个方面上进行了优化,同时能克服传统识别方法中的问题。因为Wi-Fi信号可以在自由空间里散射,并且能够穿过视线达不到的地方,如果不考虑衰减的话,
作为国家刑罚执行机关的监狱或看守所(以下简称“狱所机关”)担负着维护社会稳定,减少和预防犯罪的职能。针对警力普遍不足、管理效率低下的现状,向“科技要警力”的诉求越来
随着淡水资源的紧缺,利用海水转化为淡水成为目前解决全球水资源危机的重要途径。光热海水淡化技术是一种以太阳辐射能为光热驱动力的开发海水淡化资源的新型太阳能光热转换的技术。海水中的重金属离子的存在也严重影响着淡化水的水质,所以重金属离子的去除也成为了亟待解决的重要问题。Ti3C2是一种具有类石墨烯结构的新型二维晶体碳化物,由于其特殊的片层结构,具有较大的表面积、良好的亲水性,且具有优异的力学、电子、磁
软枣猕猴桃(Actinidiaaruguta)作为一种新兴的野生猕猴桃资源,在我国地域分布最广且开发利用价值很高,得到世界各国的广泛关注。近年来,随着对软枣猕猴桃人工驯化栽培趋势的
为了降低有机电致发光器件的生产成本并简化器件制备工艺,开发一系列可溶液加工的小分子空穴传输材料是十分重要的。本文设计并合成了五个基于咔唑基二苯胺的小分子空穴传输材料,其中两个为对称分子N_2,N_2,N_7,N_7-四(4-(3,6-二叔丁基-9H-咔唑基)苯基)-9,9-二甲基芴-2,7-二胺(p-BCz-F)与N_2,N_2,N_7,N_7-四(4-(2,7-二叔丁基-9H-咔唑基)苯基)-9
本文研究了线性离散时间系统的间接鲁棒自适应控制方法问题,主要分为两部分:1.基于多项式方法的间接鲁棒自适应极点配置控制设计.研究了一类具有未建模动态和有界扰动的线性
本文利用华北和东北158个气象站1960-2009年共50年的逐日降水、风速和天气现象资料,以及两个区域11个站降水对比观测试验数据,发展了华北全年降水和东北冬半年降雪观测误差的