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厚叶五味子（Kadsura coccinea）,为五味子科（Schisandraceae）南五味子属（Kadsura）的多年生常绿木质藤本植物,具有行气活血、祛风活络、散瘀止痛等功效,其果实称为“布福娜”,是一种野生珍稀水果,富含多酚类、木脂素类、三萜类、维生素、氨基酸、微量元素等物质,具有抗氧化、抗菌、抑酶、保肝等生物活性。课题组前期研究表明,厚叶五味子果皮氯仿提取物具有良好的抗炎和抗肿瘤生物活性,故本文采用LC-MS技术结合网络药理学的方法,对果皮的抗炎抗肿瘤活性成分及作用机制进行了研究。本文主要研究内容及结果如下:（1）使用LC-MS对厚叶五味子果皮氯仿提取物中的化学成分进行鉴定和表征。利用保留时间、分子式、分子离子峰、分子量和MS/MS裂解碎片等信息,结合相关文献,推测并鉴定得到20个化学成分,包含9个木脂素和11个三萜。（2）厚叶五味子果皮醇提物的氯仿萃取部位化学成分分离及结构鉴定。采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS、半制备高效液相等色谱及重结晶分离纯化技术,通过~1H-NMR、13C-NMR和MS并结合理化常数,共鉴定得到5个化合物:β-sitosterol（Kcp-1,200.0 mg）、Neokadsuranic acid A（Kcp-2,39.0 mg）、Seco-neokadsuranic acid A（Kcp-3,87.0 mg）、12α-Acetoxycoccinic acid（Kcp-4,50.0mg）、12β-Acetoxycoccinic acid（Kcp-5,80.0 mg）;化合物Kcp-1为甾体类,化合物Kcp-2、Kcp-3、Kcp-4、Kcp-5为三萜类,其中化合物Kcp-2、Kcp-3、Kcp-4、Kcp-5首次从厚叶五味子果皮中分离得到。（3）基于网络药理学方法的厚叶五味子果皮抗炎免疫抗肿瘤作用机制探讨。使用TCMSP、Sym Map、Stitch等数据库收集得到20个化合物的177个作用靶点,使用Dis Ge NET、Gene Cards、OMIM等数据库收集得到613个抗炎免疫抗肿瘤疾病靶点,两部分靶点求交集获得41个厚叶五味子果皮抗炎免疫抗肿瘤靶点,对靶点进行PPI分析以筛选关键靶点,通过DAVID数据库平台对筛选得到的关键靶点进行GO功能、KEGG通路、疾病和组织富集分析。筛选得到EGFR、PTGS2、JUN、ESR1、CASP3、MAPK14、MAPK1、MAPK8等20个关键靶点,主要调控TNF信号通路、癌症中的蛋白聚糖、MAPK信号通路、幽门螺杆菌感染中的上皮细胞信号传导、百日咳、Gn RH信号通路等通路,主要作用于大肠癌、慢性肾功能衰竭、乳腺癌、食管腺癌、肺癌等疾病,在正常乳腺、乳腺癌的白细胞、上皮、乳腺癌患者的正常乳腺组织中较高表达。（4）分子对接技术验证化合物Kcp-2、Kcp-3、Kcp-4、Kcp-5与关键靶点EGFR、ESR1、CASP3、MAPK14、MAPK1、MAPK8的结合能力。从PDB数据库中获得这6个关键靶蛋白的晶体结构,以结构中携带的小分子配体为参考,使用Auto Dock 4.2筛选化合物配体与关键蛋白的最优结合构象。结果显示,4个化合物与关键靶蛋白的结合能低于-8.0 kcal/mol,能与其活性位点氨基酸残基形成稳定的氢键和疏水相互作用,其中与MAPK8、CASP3的结合能和抑制常数优于小分子配体,表明这些化合物与关键靶蛋白具有较好的结合活性。（5）化合物Kcp-2、Kcp-3、Kcp-4、Kcp-5的体外抗炎抗肿瘤活性评价。采用LPS诱导的RAW264.7细胞模型,研究这4个化合物对其NO产生的影响,结果显示,4个化合物在无毒浓度范围内以剂量依赖性方式显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的产生,IC50分别为2.356μg/m L、2.228μg/m L、3.345μg/m L、2.630μg/m L,提示4个化合物具有良好的抗炎活性;通过CCK-8法检测4个化合物对4T1细胞的毒性作用,IC50分别为10.420μg/m L、2.737μg/m L、3.557μg/m L、5.696μg/m L,提示4个化合物能够显著抑制4T1细胞的增殖,且呈剂量依赖性。（6）基于4T1乳腺癌小鼠模型,研究厚叶五味子果皮氯仿提取物（KCP）的体内抗肿瘤功效,并进行初步的机制探讨。结果表明,KCP以剂量依赖性方式显著抑制4T1乳腺癌肿瘤的生长,并促进肿瘤组织的凋亡;与模型组相比,KCP各剂量组对小鼠体重、主要脏器、血常规均无明显影响,并能改善免疫器官脾脏的损伤;实时定量PCR结果显示,KCP上调IL-6、IL-1β、i NOS和TNF-α的m RNA表达水平,下调COX-2的m RNA表达水平,且呈剂量依赖性;Western Blot结果显示,KCP以剂量依赖性方式显著上调p-ERK/ERK、p-JNK/JNK和p-P38/P38的表达,下调COX-2的表达。