南方红豆杉针叶中主要紫杉烷类成分的提取富集研究

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本研究选择木本药用植物资源南方红豆杉可再生针叶为材料,设计并合成了一种绿色可回收的薄荷醇基的低共熔溶剂水溶液两相溶剂体系,成功利用该溶剂体系对针叶中的七种目标紫杉烷功能成分进行绿色高效提取,并通过一系列的单因素实验对超声辅助两相溶剂体系的提取过程进行了参数优化,同时根据溶剂两相分离特性对提取液中的紫杉烷成分进行富集分离。具体研究结果如下:1、建立了高效液相色谱同时分析检测南方红豆杉针叶中七种紫杉烷功能成分的方法:色谱柱:Phenomenex-Gemini 5μC18(250 mm×4.6 mm,5μm);检测波长:234nm;进样量:20μL;柱温:35℃;流速:1.0 m L/min;流动相:水(A)-乙腈(B)。洗脱方法:0-5 min,37%-37%(B);5-12 min,37%-45%(B);12-25 min,45%-60%(B)。该检测方法可以在25分钟内定量分析七种紫杉烷成分,且该方法的线性关系(R2>0.999)较好,重现性和精密度(RSD<4.00%)较高,加样回收率高(90.26-109.00%)。2、建立了新型薄荷醇/正丁醇低共熔溶剂的水溶液两相体系,并对超声辅助两相溶剂体系提取七种目标紫杉烷成分的工艺参数进行设计和优化,最佳提取条件:低共熔溶剂:薄荷醇/正丁醇=1/1(摩尔比);含水量:50%;固液比:1:30 g/m L;提取时间:30 min;超声功率:250 W。在上述最佳的条件下,10-DAB III、baccatine III、7-xyl-10-DAT、10-DAT、cephalomannine、7-epi-10-DAT and paclitaxe的得率依次是626.44μg/g、120.48μg/g、546.95μg/g、236.49μg/g、105.69μg/g、166.44μg/g、162.75μg/g,提取效果比传统提取溶剂甲醇、乙醇和80%乙醇提高了0.27-1.65倍。3、利用减压蒸馏结合冰盐浴技术对七种紫杉烷化合物和低共熔溶剂进行了回收:七种目标紫杉烷成分的富集收率介于95.31-99.28%范围内。低共熔溶剂至少可以重复使用三次,三次后目标成分富集收率可到95.01%以上,薄荷醇和正丁醇的回收率分别为84.79%和68.90%。本研究建立了一种精确、快速检测南方红豆杉针叶中紫杉烷类功能成分的分析检测方法以及一种新型的低共熔溶剂水溶液两相溶剂体系提取富集南方红豆杉针叶中紫杉烷的一体化关键技术,具备绿色环保、提取效果好、操作简捷、成本便宜等特点,对红豆杉可再生资源可持续研发应用具有较高的科学参考价值,同时对我国森林资源高附加值绿色加工和高值化利用有一定的指导意义。
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