论文部分内容阅读
目的:本研究将实时荧光定量PCR技术(Real-time Flurescent Quantitive Polymerase Chain Reaction,RTFQ-PCR)应用于侵袭性真菌感染(Invasive fungal infection IFI)的早期诊断,旨在评价RTFQ-PCR技术在IFI早期诊断中的应用价值,为早期诊断与治疗IFI提供依据。方法:1、采集宁夏医科大学总医院及心脑血管病医院ICU科2015年5月至2016年3月IFI高危患者102份血清,同时收集其相关临床资料。2、送检血培养、G试验。3、RTFQ-PCR检测:(1)提取白色念珠菌DNA,经PCR扩增出目的基因片段并回收,然后倍比稀释,分别计算出拷贝数,最后经RTFQ-PCR检测,由软件绘制出标准曲线。(2)提取IFI高危患者血清中的DNA,进行RTFQ-PCR检测,收集实验数据。4、根据“重症患者IFI的诊断和治疗指南(2007年)”制定的诊断标准,将纳入的研究对象分为:确诊IFI、临床诊断IFI、拟诊IFI及非IFI。将“2007年指南”作为金标准,以确诊和临床诊断病例作为感染组,非IFI病例作为非感染组,将感染组和非感染组分别作为阳性对照病例和阴性对照病例,计算RTFQ-PCR和G试验的敏感度(Sensitivity Se)、特异度(Specificity Sp)、阳性预测值(Positive predictive value PPV)、阴性预测值(Negative predictive value NPV),分析评价RTFQ-PCR在IFI早期诊断中的应用价值。5、以血培养为金标准,将血培养阳性作为阳性对照病例,血培养阴性做为阴性对照病例,计算RTFQ-PCR的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果:1、本次研究收集了102份标本,最终共纳入99份标本做为研究对象,其中,确诊IFI病例2例,临床诊断IFI病例20例,拟诊IFI病例28例,非IFI病例49例。以“2007年指南”作为金标准,计算RTFQ-PCR的敏感度为50%,特异度为96%,阳性预测值为82%,阴性预测值为84%;G试验的敏感度为54%,特异性为92%,阳性预测值为76%,阴性预测值为80%;联合应用RTFQ-PCR和G试验的敏感度为78%,特异度为88%,阳性预测值为70%,阴性预测值为91%。2、以血培养为金标准,计算RTFQ-PCR的敏感度为100%,特异度为88%,阳性预测值为15%,阴性预测值为100%。结论:1、真菌RTFQ-PCR检测技术可以作为重症患者IFI早期诊断的一种有效手段,在临床上对IFI的早期诊断中具有一定的价值。2、RTFQ-PCR和G实验的联合应用,综合诊断价值较高,可以改善IFI的早期诊断率。