【摘 要】
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研究目的:研究circ-0010928对人心脏微血管内皮细胞（Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells,HCMECs）功能的影响,进一步探究与circ-0010928结合miRNA的相互作用,并研究它们对血管再生的调控机制。研究方法:（1）模拟缺氧实验,诱导人心脏微血管内皮细胞凋亡。（2）使用qPCR检测缺氧内皮细胞中circ RNA的表达水平。（
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研究目的:研究circ-0010928对人心脏微血管内皮细胞（Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells,HCMECs）功能的影响,进一步探究与circ-0010928结合miRNA的相互作用,并研究它们对血管再生的调控机制。研究方法:（1）模拟缺氧实验,诱导人心脏微血管内皮细胞凋亡。（2）使用qPCR检测缺氧内皮细胞中circ RNA的表达水平。（3）使用circ-0010928过表达质粒和阴性对照（NC）转染HCMECs,增强circ-0010928在内皮细胞中的表达水平。（4）将HCMECs分成正常组,缺氧对照组（circ-0010928未转染,过表达,阴性对照）四组,通过qPCR检测,CCK8实验、成管实验、迁移实验、划痕实验和流式细胞实验,分别检测细胞的活性、成管、迁移凋亡、增殖能力。（5）生信分析circ-0010928作为海绵的下游miRNA,并进行qPCR检测缺氧条件下,miRNA在HCMECs的表达水平。（6）使用miR-921小干扰RNAs（siRNAs）和si-NC转染HCMECs,沉默miR-921在内皮细胞中的表达水平。（7）通过双荧光素酶实验验证circ-0010928是否作为miR-921的海绵。（8）将HCMECs分成正常组,缺氧对照组（miR-921未转染,过表达,阴性对照）四组,通过qPCR检测,CCK8实验、成管实验、迁移实验、划痕实验和流式细胞实验,分别检测细胞的活性、成管、迁移凋亡、增殖能力。（9）生信分析miR-921下游靶点。（10）通过qPCR检测和双荧光素酶实验验证LSM14A是否作为miR-921的下游靶点。研究结果:（1）通过生信分析和qPCR检测筛选发现,circ-0010928在内皮细胞中的表达水平具有显著差异（p＜0.05）。（2）过表达circ-0010928后的HCMECs与正常组比较,HCMECs的活性、迁移、成管和增殖活性降低,凋亡率升高（p＜0.05）。（3）通过生信分析和qPCR检测筛选发现,miR-921在内皮细胞中的表达水平具有显著差异,在过表达circ-0010928后的HCMECs中表达也显著下调（p＜0.05）。（4）通过双荧光素酶实验验证,证实circ-0010928作为miR-921的海绵调节血管生成。（5）敲低miR-921后的HCMECs与正常组比较,HCMECs的活性、迁移、成管和增殖活性降低,凋亡率升高（p＜0.05）。（6）通过生信分析和qPCR检测筛选发现,LSM14A在内皮细胞中的表达水平具有显著差异,在过表达circ-0010928和敲低miR-921后的HCMECs中表达也显著升高（p＜0.05）。（7）通过双荧光素酶实验验证,证实LSM14A可能作为miR-921的下游靶基因调节血管内皮细胞的再生。结论:（1）Circ-0010928具有负向调节HCMECs的作用,具有抑制血管再生的效果。（2）Circ-0010928作为miR-921海绵调节血管生成。（3）miR-921具有正向调节HCMECs的作用,具有促进血管再生的效果。（4）miR-921可能通过调节LSM14A调节血管生成。（5）缺氧诱导的HCMECs可能通过调节circ-0010928/miR-921/LSM14A网络,实现血管再生的调控。
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