番石榴叶(Psidium guajava linn)为桃金娘科(Myrtaces)番石榴属(Psidium)植物番石榴的干燥叶,所含成分包括黄酮、萜类以及酚酸类化合物。药理研究表明具有降血糖、降血脂、抗病毒、抑菌等活性作用。高速逆流色谱作为一类无固体载体的液液分配色谱,具有无死吸附、制备量大、操作简便等特点,广泛应用于天然产物的分离纯化。本文通过柱色谱技术与高速逆流色谱结合,为番石榴叶成分分离提供一种可行的技术手段。同时本实验研究了番石榴叶黄酮类化合物对高糖浓度下人肝癌细胞HepG2增殖影响,以期为进一步药理活性研究提供参考。本文主要分为三部分1综述总结了高速逆流色谱法在天然产物中的应用及溶剂选择方法,高速逆流色谱溶剂系统可分为四类：非极性体系、弱极性体系、中等极性体系及亲水性体系,对应于不同极性化合物的分离。番石榴叶主要含有黄酮类、萜类、酚酸类以及挥发油类成分,其中三萜类化合物主要为熊果酸型和齐墩果酸型五环三萜类成分,杂源萜类为一类具有苯二醛基的结构,番石榴叶中黄酮化合物主要包括槲皮素、山奈酚、桑黄素、杨梅素及以其组成的糖苷,药理研究表明番石榴叶具有降血糖、降血脂、抗菌、抗病毒等活性作用。2番石榴叶成分提取分离本实验利用硅胶柱层析,采用不同比例的石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇进行洗脱,重结晶后得到Guavadial和p-谷甾醇。利用高速逆流色谱以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3：1.5：0.5：3,v/v/v/v)及制备高效液相液相纯化得到山奈酚与芹菜素,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(1：4：1：4,v/v/v/v)、石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3：1：1：3,v/v/v/v)洗脱及葡聚糖凝胶柱纯化得到槲皮素.3番石榴叶黄酮类化合物对高糖浓度下HepG2细胞增殖影响本实验研究了不同浓度的槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷、槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷、槲皮素5类黄酮苷及苷元对高糖浓度下人肝癌细胞HepG2细胞增殖。研究结果表明槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(75μg/L)、槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(10μg/L)含药组具有显著的促进细胞增殖作用,显示该类型化合物在抗糖尿病方面的潜力。