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目的:探究磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C epsilon(phospholipase C epsilon,PLCε)和Yes相关蛋白(yes associated protein,YAP)在前列腺组织中的表达情况和相关性,以及两者与临床病理参数的关联性;探究血液标本中丝氨酸/甘氨酸浓度水平;研究PLCε对前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞丝氨酸/甘氨酸代谢及细胞增殖的具体作用机制。方法:液相色谱-串联质谱(Liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)和气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)技术检测血液标本中的氨基酸水平;免疫组织化学染色(Immunohistochemistry,IHC)和H&E技术检测前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH)和PCa组织标本中PLCε、YAP表达水平;慢病毒及质粒转染PCa细胞,q-PCR、Western blot分别检测细胞中PLCε、YAP、丝氨酸/甘氨酸生成酶及增殖相关基因的mRNA和蛋白表达情况;克隆形成实验检测PCa细胞的克隆形成情况;MTT实验检测细胞的增殖活性;免疫荧光技术(Immunofluorescence,IF)检测YAP的细胞定位和分布情况;Western blot检测YAP在胞核及p-YAP在胞浆中的表达情况。丝氨酸/甘氨酸生成途径中的关键酶包括其中三个:磷酸丝氨酸转氨酶1(PSAT1)、磷酸丝氨酸磷酸酶(PSPH)、丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2);增殖相关基因包括两个:细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)。结果:PCa患者血液中丝氨酸/甘氨酸浓度明显高于正常人;同时,与BPH组织相比,PCa组织中PLCε、YAP染色强度显著升高,并且与临床分期和Gleason评分有关;(1)感染LV-shPLCε可使PCa细胞的PLCε、YAP、丝氨酸/甘氨酸生成关键酶及增殖相关基因的表达显著下调,亦能抑制细胞的克隆形成能力和增殖活性;(2)加入过表达质粒vector-YAP后,能明显逆转慢病毒干扰PLCε引起的YAP、PSAT1、PSPH、SHMT2及增殖相关基因的下调,但干扰PLCε的同时加入干扰质粒sh-YAP后抑制效果最明显,干扰及过表达质粒的加入对PLCε均无明显影响;(3)敲低PLCε后PCa癌细胞胞核内YAP的荧光强度显著减弱;(4)干扰PLCε使细胞胞核YAP表达明显下调,反之胞浆中p-YAP的水平出现明显上调。结论:PCa患者血液中丝氨酸/甘氨酸浓度水平异常升高;PLCε和YAP在PCa组织中均呈高表达且有显著相关性,均与临床分期及Gleason评分密切相关;干扰PLCε可阻滞PCa细胞的丝氨酸/甘氨酸生成以及细胞增殖,而PLCε是通过调控YAP的表达实现这一途径的;另外,PLCε影响YAP具体机制是调控其核转位及去磷酸化。