目的：5-氟尿嘧啶(5-Fu)为目前临床常用化疗药物，该药物主要通过干扰细胞内核酸的合成来抑制肿瘤细胞生长。但同时，该药物也对正常细胞也具有一定毒性，常给患者带来严重的副作用，如肠粘膜损伤和免疫抑制等。益生菌制剂目前在临床上已得到了一定的应用，其主要作用在于调节人体微生态系统的平衡，保护粘膜不受损伤以及调节机体免疫。在本研究中，采用短双歧杆菌，嗜酸乳杆菌，干酪乳杆菌和嗜热链球菌制成益生菌合剂，探究其对5-Fu所诱发的几种副作用的保护作用，并且检测所选用益生菌的安全性，为下一步的临床应用打下基础。方法：（1）益生菌保护作用的评价：28只SPF级SD大鼠随机分为4组，每组7只，分别为正常组，5-Fu+生理盐水组，5-Fu+低剂量益生菌组，5-Fu+高剂量益生菌组。化疗时间总共5天，益生菌干预总共8天。大鼠处死后应用PCR-DGGE技术测定肠道菌群变化，鲎试剂测定血浆内毒素含量，HE染色观察肠粘膜变化和脾脏变化。（2）益生菌有害代谢物质检测：采用试剂盒分别检测4种益生菌是否产硝酸还原酶，在BASM液体培养基上检测是否产生氨基脱羧酶，使用血平板检测是否产溶血素。（3）耐药性检测：使用药敏纸片法分别检测各益生菌的耐药性。（4）质粒检测：使用质粒提取试剂盒检测是否含有质粒。（5）益生菌急性毒性试验：清洁级大鼠随机分为2组，每组10只，通过一次性大剂量对大鼠进行益生菌灌胃，检测其死亡率、粪便性状、脏器病变、细菌易位、体重变化、肝脏GSH含量和血清MAD含量。结果：（1）保护作用研究表明，灌服益生菌的大鼠与单纯化疗组相比，其肠道菌群失调和体重减轻情况有明显改善(P<0.05)，血浆内毒素含量明显降低(P<0.01)，肠粘膜损伤明显减轻(P<0.01)，脾脏淋巴细胞明显增多，组织结构完整。（2）氨基酸脱羧酶检测表明，只有嗜热链球菌和嗜酸乳杆菌为阳性，其余为阴性。同时，在硝酸还原酶检测、溶血素检测和质粒检测中，所测菌株均为阴性。（3）急性毒性试验表明，大剂量灌服益生菌后，大鼠体重明显增加(P<0.05)，没有出现死亡，各脏器经解剖观察未发现明显病变，无细菌易位，无腹泻情况。血清MAD和肝脏GSH含量与对照组相比均无明显差异（P>0.05）。结论：该多联益生菌制剂具有良好的安全性，并且能有效改善5-Fu对大鼠肠粘膜及肠道菌群的破坏，同时减轻5-Fu对脾脏的损伤。