论文部分内容阅读
自从1987年法国医生Mouret成功开展腹腔镜胆囊切除术以来,微创外科的观念逐渐被广泛接受。同时腹腔镜在肿瘤切除手术中的应用亦日益开展,成为肿瘤外科的热点之一。然而,近年来有临床报道发现腹腔镜肿瘤手术后肿瘤腹腔扩散和穿刺点转移(Port-site metastasis,PSM)有较高的发病率,使此项技术在肿瘤外科方面的推广受到质疑。目前,国内外学者的许多研究主要集中在CO2气腹引起种植转移和加速肿瘤细胞生长等方面。研究结果显示,CO2气腹下腹腔内气体的流动可造成手术穿刺孔的种植转移,CO2气体形成的腹腔局部微酸性环境可促进某些肿瘤细胞的生长。已有研究证实,消化系统肿瘤患者在手术时血液中存在有游离的肿瘤细胞,这些肿瘤细胞与血路转移的发生有一定的相关性。在腹腔镜手术中,CO2气腹无疑会对腹腔内血管形成一定的压力,从而影响血流动力方面的变化,这种变化是否会影响肿瘤细胞的血路转移值得关注。目前国内未见有关于CO2气腹对肿瘤细胞血路肝转移实验研究的报道。在本实验中,我们通过建立稳定的大鼠体内CO2气腹模型,先经门静脉注入转染GFP基因的C57BL/6小鼠肝细胞,采用不同强度的CO2气腹压力进行处理;比较分析了不同气压处理术后GFP标记活细胞经血路迁徙在大鼠肝内积聚、表达的情况;目的是探讨腹腔镜不同CO2气腹压力对细胞经血路肝迁徙的影响,并初步探讨其作用机理。从而间接分析阐述CO2气腹促进肿瘤细胞经血路肝转移发生的可能机理。为今后临床腹腔镜CO2气腹手术中肿瘤血路肝转移的防治提供实验和理论依据。目的:探讨腹腔镜CO2气腹对细胞经血路肝迁徙的影响,并初步探讨其作用机理。方法:将SD大鼠剖腹,经门静脉注入转染GFP的小鼠肝细胞(5×106cells/只)。关腹后随机分成4组(每组10只),快速建立大鼠体内CO2气腹模型,分组采用持续性不同强度的CO2气腹压力(0mmHg、5mmHg、10mmHg、15mmHg)进行处理。30min后处死动物取出肝脏,取部分肝组织行快速冰冻切片检查,比较各组动物肝内荧光细胞的表达情况。结果:1.各组GFP荧光细胞表达阳性率比较:无气腹处理组8/10例,5mmHg处理组9/10例,10mmHg处理组9/10例和15mmHg处理组10/10例;虽然气腹处理组阳性率高于无气腹处理组,但各组间差异无统计学意义(χ2=2.22,P=0.53)。2.各组GFP荧光细胞表达的情况:10mmHg和15mmHg高压力气腹组GFP荧光细胞表达明显强于5mmHg低压力气腹组和无气腹组。3.各组GFP荧光细胞数目比较:无气腹处理组、5mmHg处理组、10mmHg处理组和15mmHg处理组GFP荧光细胞数目分别为6.63±2.45、7.67±2.83、13.89±4.37、15.50±6.29。其中,15mmHg处理组和10mmHg处理组GFP荧光细胞数目均明显高于无气腹处理组和5mmHg处理组,有显著统计学差异(P<0.01)。15mmHg处理组和10mmHg处理组之间、无气腹处理组和5mmHg处理组之间GFP荧光细胞数目却无明显差异(P>0.05)。结论:1.腹腔镜CO2气腹能促进细胞经血路肝脏迁徙、积聚的发生,并且随着气腹压力的升高作用越明显。初步认为其主要机理与高腹部气腹压力减损了肝门静脉的血流从而导致细胞容易在肝脏聚集有关。2.腹腔镜CO2气腹可能通过减损肝门静脉系统的血流,增加肿瘤细胞经血路肝脏转移、积聚的机会,促进肝转移瘤的发生。在临床腹腔镜肿瘤手术中,我们可以通过建立较低压力的CO2气腹来规避肿瘤细胞经血路肝脏转移的风险。