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本文采用SMT法、苛性钠法、过氧化氢法及BTB法等4种方法,对某奶牛场进行了隐性乳房炎的检测。共检测奶牛350头,隐性乳房炎阳性率为50.86%;检测乳区1358个,乳区阳性率为26.66%;在362个阳性乳区中,细菌检出率为86.19%。分离到的细菌中,以金黄色葡萄球菌、停乳链球菌和无乳链球菌为主,分别占40.44%、19.11%和18.22%。结果表明,该牛场隐性乳房炎发病率较高,而金黄色葡萄球菌则是引起本牛场隐性乳房炎的主要病原。
根据检测结果,以大肠杆菌DH5α表达的金黄色葡萄球菌毒素蛋白为抗原制备了铝胶佐剂疫苗,并进行了免疫试验。选择隐性乳房炎阳性奶牛、经产健康奶牛、初产健康奶牛各20头作为3个免疫组,分别接种3次疫苗,各设立相应的不免疫对照组。采用三项指标评价了该疫苗免疫在控制金黄色葡萄球菌乳房炎中的效果,即,用SMT法检测各免疫组与其相应对照组的隐性乳房炎发病率,记录每头奶牛的日均产奶量,并用本试验建立的间接ELISA检测各免疫组及其对照组抗金黄色葡萄球菌毒素蛋白的抗体水平。
统计分析表明,在3免后3个月,3个免疫组的隐性乳房炎发病率均明显低于其对照组,免疫接种的有效率分别为55.6%、66.7%和50.0%。各免疫组的产奶量均明显提高,分别比各自对照组增加了12.84%、10.29%和9.10%。间接ELISA的检测结果表明,金黄色葡萄球菌疫苗免疫后,各免疫组均产生了较高的抗金黄色葡萄球菌毒素蛋白的特异性抗体。在免疫前各组和对照组平均血清抗体效价为1:188的情况下,各免疫组首免后15天、2次免疫后15天、3次免疫后1个月,平均血清抗体效价为1:16089、1:16552、1:17029;至3免后5个月,血清抗体仍然维持较高水平。结果表明,用金黄色葡萄球菌毒素蛋白制备的疫苗进行免疫可有效降低金黄色葡萄菌乳房炎的发生。