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本文以脐血CD34+细胞作为研究对象,从体内/外两个角度系统研究了脐血CD34+细胞诱导生成肝样细胞的可行性.
首先,采用2-AAF与CCl4处理ICR小鼠,建立了急性肝损伤动物模型,考察了脐血CD34+细胞在肝损伤ICR小鼠体内修复肝脏形态与功能以及诱导生成肝样细胞的可行性.结果发现,移植CD34+细胞可促进肝损伤ICR小鼠肝脏形态与功能的恢复;移植CD34+细胞21天后,在肝损伤小鼠的肝脏内可检测到人血清白蛋白(hALB)的mRNA;28天后,可在小鼠肝组织细胞中检测到hALB蛋白的表达,并在小鼠的外周血中可检测出hALB蛋白.而移植CD34+细胞至正常ICR小鼠体内,未出现诱导生成肝样细胞的现象,也不会对小鼠肝脏的形态和功能带来明显的不利影响.
其次,选用肝细胞生长因子(HGF)、表皮细胞生长因子(EGF)、人白血病抑制因子(LIF)、制瘤素M(OSM)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)及干细胞生长因子(SCF),设计了49种细胞因子组合体外培养脐血CD34+细胞,通过检测肝细胞相关蛋白的mRNA的表达以及肝细胞生理功能,系统考察了细胞因子组合体外诱导CD34+细胞向肝样细胞转化的效果.结果显示,体外细胞因子组合的刺激仅仅使脐血CD34+细胞产生了向肝样细胞转化的趋势,但并未能获得转录肝细胞特征蛋白ALB与AFP mRNA的细胞,诱导后的细胞也不具有肝细胞特有的表达ALB蛋白以及解毒功能.说明脐血CD34+细胞未能在体外通过细胞因子组合诱导生成肝样细胞.
以上研究结果,可为将来应用脐血造血干细胞治疗肝脏疾病提供技术支持.