【摘 要】
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本实验以牛为研究对象,对其血液白细胞抗菌肽成份进行了提取和分离,并初步研究了对小白鼠免疫功能的影响。本实验分为两个系列。系列1牛白细胞抗菌肽的提取与分离抗菌肽的提
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本实验以牛为研究对象,对其血液白细胞抗菌肽成份进行了提取和分离,并初步研究了对小白鼠免疫功能的影响。本实验分为两个系列。系列1牛白细胞抗菌肽的提取与分离抗菌肽的提取采集牛的新鲜抗凝血,应用0.83%氯化铵溶液裂解至镜检无红细胞,低温离心,收集白细胞沉淀。将白细胞沉淀超声波破碎至镜检无完整细胞,低温高速离心提取细胞颗粒。10%醋酸溶液4℃下搅拌萃取抗菌肽,低温高速离心收集上清液,真空冷冻干燥,用0.01%醋酸溶液溶解即为抗菌肽。抗菌肽的分离应用离子交换层析法将抗菌肽初步分离成两部分即阴离子组分和阳离子组分。系列2牛白细胞对小白鼠免疫功能的影响用上述方法制备的牛白细胞测定其对小白鼠免疫功能的影响。实验动物分A、B两组,各组随机分为五组:对照组、蛋白对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。每组10只小白鼠,其中5只饲喂15 d,5只饲喂20 d,每日定时饲喂一次,灌胃15 d或20 d后的第二天清晨采样,A组测定小鼠的碳粒廓清指数;B组利用流式细胞仪测定小鼠外周血T细胞亚群及小鼠的免疫器官指数。测定结果表明:牛白细胞灌胃不同剂量15 d或20 d后,与对照组相比,中剂量组的免疫器官指数及T细胞亚群CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+差异极显著(P＜0.01),细胞吞噬指数差异显著(P＜0.05);高剂量组的免疫器官指数、T细胞亚群CD3~+、CD4~+及CD4~+/CD8~+差异显著(P＜0.05)。初步说明牛白细胞能明显提高小白鼠的机体免疫力。牛白细胞灌胃15 d和20 d后,各项免疫指标都有明显提高,但是灌胃15 d的各组和灌胃20 d的各组,中剂量组的各项免疫指标比高级两组的各项免疫指标提高的明显。本研究结果提示:7.5mg/mL的牛白细胞能明显增强小白鼠的免疫功能。
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