两水相体系(ATPS)是很有工业应用前景的生物纯化技术和生物转化手段，但两水相成相聚合物的循环利用问题成为该技术应用的最大障碍。本论文中，采用了实验室前人合成的pH敏感聚合物和光敏感聚合物形成的新型可回收两水相体系，两种聚合物都可以多次重复回收，单水相中两种聚合物的回收率均为97％以上，形成两水相后再次回收聚合物，两者的回收率也在96％以上，连续操作稳定性好。　　 将此可回收两水相体系应用于分离纯化脂肪酶的研究。由于脂肪酶的来源不同，在本论文中分别研究了两种来源的脂肪酶在两水相体系中的分配，即动物来源与微生物来源。根据两水相体系的特点，论文中对于三种酶分别均考察了上相聚合物PNNC浓度、体系pH、各种无机盐及不同盐浓度对于脂肪酶分配系数的影响。对于猪胰脂肪酶纯酶而言，当上相聚合物浓度为10％(w/w)，体系pH为7.5，加入20mM KBr时该酶有最佳分配系数为0.061。对于脂肪酶粗酶而言，当上相聚合物浓度为10％(w/w)，体系pH为7.4，加入20mM KBr时出现最佳分配条件，在此条件下脂肪酶的纯化倍数为18倍，酶回收率为83.7％。对于由微生物发酵得到的脂肪酶，我们考察了由假丝酵母发酵得到的脂肪酶，发现当上相聚合物浓度达到10％(w/w)，体系pH为7.3，向体系中加入40mMKCl时分配系数最小，可以达到0.107。　　 当分配实验结束后，对两相聚合物也进行了回收，并且重复多次利用，实现了两种聚合物高回收且重复利用的愿望。