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猫豆是豆科藜豆属植物龙爪藜豆(Mucuna pruriens var.utilis Burck)的种子,其中含有大量的左旋多巴(4-7%),是一种被广泛用于治疗帕金森病的传统药材。与传统左旋多巴制剂相比,猫豆提取物(MPE)在长期治疗帕金森病过程中不会造成异动症等副作用。除左旋多巴外,猫豆中还含有其衍生物,如包括1,1-二甲基-3-羧基-6,7-二羟基-1,2,3,4-四氢异喹啉(MD01)在内的简单异喹啉类氨基酸类微量成分。本论文建立了同时测定大鼠血浆中左旋多巴及MD01的可靠、灵敏的液质联用检测方法,并应用于大鼠单次及多次灌胃给予左旋多巴、MPE及左旋多巴/MD01后的药代动力学研究,为阐明猫豆中含有的其它成分是否对左旋多巴药代动力学特征产生影响提供数据参考。在LC-MS/MS分析方法开发中,对质谱方法、色谱方法、样品处理方法及稳定剂条件等方面进行了优化。质谱检测采用电喷雾离子源(ESI)正离子模式多反应检测(MRM)方法,左旋多巴、MD01及内标甲基多巴的监测离子对分别为m/z 198.1?135.0、m/z 238.3?175.2及m/z 212.1?139.0。为解决其基质效应导致的离子抑制,对色谱条件及样品提取条件进行了系统的优化,最终选用Thermo Aquasil C18色谱柱(50×2.1 mm,3μm),乙腈及0.2%甲酸水溶液作为流动相,以0.6 mL/min流速进行梯度洗脱,在得到理想保留的情况下将基质效应的影响降低。由于化合物存在蛋白结合现象,使用纯乙腈沉淀时回收率不理想,通过优化最终选用2%甲酸乙腈进行蛋白沉淀以获得较好的提取回收率。左旋多巴及MD01容易氧化降解,因此利用抗氧化剂焦亚硫酸钠使其在纯溶液及基质中保持稳定。本方法线性范围为20.0-10000 ng/m L,分析时间短(3.5 min),具有较好的准确度(RE-9.7%~10.8%)及批内、批间精密度(RSD≤12.3%)。该方法经完整验证后运用于单次及多次灌胃给予左旋多巴、MPE、左旋多巴/MD01后的大鼠血浆中左旋多巴检测。其药代动力学结果显示:在同等剂量下单次灌胃给药后的各组间差异并不明显,与左旋多巴给药组相比,MPE给药组及左旋多巴/MD01给药组仅在平均滞留时间(MRT)上有所提高;而在连续给予MPE 408 mg/kg 7天后,左旋多巴的AUC(0-∞)为641405±81451 ng?min/mL,与连续给予左旋多巴单体(AUC(0-∞):416824±109850 ng?min/m L)相比有明显升高。该研究结果揭示,采用MPE多次给药时的主要药效成分左旋多巴具备更好的生物利用度,因而与左旋多巴单体成分相比,MPE在帕金森病长期药物治疗方面更具优势。