苹果多肽编码基因MdCEP1的克隆及功能鉴定

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shmilygang8751
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
植物激素广泛参与了植物的生长、发育以及抗逆等过程,在植物生命活动过程中发挥了重要作用。植物多肽激素是一类经过蛋白酶体剪切后形成的具有特殊功能的成熟的多肽,其长度通常小于20个氨基酸,并且在植物体内含量极低。近年来的研究表明,植物体内的多肽激素通过细胞与细胞之间的信息传递参与到植物发育系统和适应极端环境条件的调控过程。CEP(C-TERMINALLY ENCODED PEPTIDE)基因编码一个小肽前体,由N端分泌信号肽、可变域、一个或多个CEP结构域和一个短的C末端延伸组成。研究表明,CEPs参与了植物根形态构建、侧根发生以及根瘤形成等过程。本研究中以‘嘎拉’苹果为研究对象,通过同源序列比对,获得苹果中与拟南芥AtCEP1同源性最高的基因MDP0000886459,将其命名为MdCEP1。分析其启动子顺式作用元件和对生长素的响应;并通过合成成熟的MdCEP1pHyp多肽以及在拟南芥中异源表达MdCEP1分析其对根系生长发育的作用。通过在苹果愈伤组织中过表达MdCEP1分析其对苹果花青苷积累的影响。主要研究结果如下:1.苹果MdCEP1基因生物信息学与表达模式分析染色体定位分析显示苹果MdCEP1基因位于苹果第15号染色体。基因结构分析显示MdCEP1只有一个外显子,无内含子。结构域分析表明MdCEP1包含一个信号肽结构域和一个CEP结构域。进化树分析显示苹果MdCEP1与白梨PbCEP1亲缘关系最近,同源性最高。启动子分析显示MdCEP1启动子序列含有与分生组织相关的CAT-box元件,赤霉素响应元件(P-box),并且含有光响应元件(MNF1)和与类黄酮合成相关的MYB类蛋白结合位点(MBSI)。表达模式分析显示,MdCEP1主要在苹果根和茎中表达。生长素响应分析显示,苹果MdCEP1对不同浓度的IAA均有明显响应。以上结果表明MdCEP1可能在不同方面参与了苹果生长发育的调控。2.苹果MdCEP1基因调控拟南芥根系发育为了研究MdCEP1的功能,首先合成了MdCEP1蛋白在植物体中的活性成分-成熟的MdCEP1pHyp多肽,配制含有不同浓度MdCEP1pHyp的培养基。对拟南芥培养发现,拟南芥的主根变短,侧根数目明显减少,并且随MdCEP1pHyp浓度的提高,抑制作用明显加强。进一步在拟南芥中异位表达MdCEP1,发现转基因拟南芥的主根长度和侧根数同样受到明显抑制。qRT-PCR结果显示,无论是MdCEP1pHyp处理的拟南芥还是过表达MdCEP1的拟南芥,生长素相关基因均明显下调,说明MdCEP1可能是通过影响生长素负调控植物根系的生长。3.苹果MdCEP1基因调控花青苷积累通过农杆菌介导的遗传转化获得MdCEP1转基因苹果愈伤组织。进一步分析发现,在低温强光下MdCEP1转基因苹果愈伤组织比野生型呈现出明显的花青苷积累的表型。qRT-PCR分析显示过表达MdCEP1能够明显促进苹果花青苷合成相关基因的表达。MdCEP1在拟南芥中异位表达,同样能够促进拟南芥中花青苷的积累,并且促进拟南芥花青苷合成相关基因的表达。研究结果表明,Md CEP1能够正调控苹果花青苷的合成。
其他文献
创新是新媒体广告发展的不竭动力。广告越独特,对消费者的吸引力也就越大,只有别具一格的新媒体广告才能满足消费者日益增长的物质文化需求。如今,受众变得更有主见了,对产品
目的:通过病理学研究了解125I-脱氧尿嘧啶核苷(125I-UdR)在正常大鼠膀胱内灌注后组织分布情况以及125I-UdR在膀胱癌大鼠模型中的分布和用药安全性。进一步对125I-UdR在荷人膀
根据好望角型船舶的船型特点,提出提高其装卸效率的方法。
目的:1.利用荷瘤裸鼠模型观察瘤内单次注射不同剂量的125I-脱氧尿嘧啶核苷(UdR)后的最大药物耐受剂量(maximum tolerated drug dose MTD)和最适剂量。2.利用裸鼠皮下膀胱癌模型瘤内
城市轨道交通因其优点成为解决城市交通问题的新选择,在我国各大中城市备受推崇,已成为城市公共交通的骨干。但是作为一种公益性建设项目,轨道交通很难吸引社会资本进行投资,必须由政府直接投资或提供补贴进行建设,这给政府财政支出带来了巨大压力,而传统建设模式已不能解决这一问题。为此,世界各地均在探索新型的建设运营模式用以解决资金和管理方面的问题。PPP管理模式作为一种新型的建设模式,其在融资和管理方面优势明
分析了干散货船舶卸船清舱作业效率低下的问题,提出了自动清舱机的卸船清舱方法,分析了自动清舱机的功能系统构成。
针对单船壳油轮改装成专用矿砂船运营的特点,采用实证分析的方法,从卸载作业及系泊安全问题为切入点,对单船壳油轮改装的船舶的运行安全性、作业适卸(装)性等问题进行探讨,提
我国处于北太平洋的西岸,一大部分葡萄酒产区处于季风性气候区,在夏秋多雨湿润的季节,很多年份保证不了酿酒葡萄原料的完全成熟,致使所酿葡萄酒缺乏夏秋少雨的海洋性气候和地
正位施肥是播种作业环节中常用的一种施肥方式。针对正位施肥时采用自然回土方式存在的种肥间距不稳定、种子覆土量不足等问题,采用主动覆土方法,设计一种基于双圆盘覆土的种肥分施装置,该装置能够有效保证种肥间距,同时对种子进行覆土。本文主要采用离散元仿真与田间试验相结合的方法,研究种肥分施装置结构参数对种肥间距和种子覆土厚度的影响,为种肥分施装置的研发提供依据。本文主要内容与结论如下:(1)土壤、肥料和玉米
随着信息化进程的深入,互联网产业快速创新发展,多样且新颖的网络服务大量涌现,数据流量出现爆发式增长。然而,传统网络架构由于体系僵化、结构复杂,无力应对互联网快速增长