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目的:目前胆道并发症的研究手段非常有限,已有的肝胆道解剖知识和肝脏灌注的理论难以用于指导移植后胆道并发症的防治,这迫切需要用更新的研究手段及方法对肝移植有关的胆道解剖学尤其是胆管周围血管丛的形态结构进行深入研究,提出肝移植术后胆道并发症防治的理论。
方法:1. 运用乙酸乙酯新溶剂代替常用的丙酮作为铸型剂完成了保留肝蒂完整的人尸肝铸型的解剖研究。用了变浓度灌注方法,避免以往灌注方法引起部分血管组织丢失的弊端,灌注动脉的同时灌注胆管与门静脉使肝铸型模型完整度高,模型完全符合解剖生理要求,阐明了肝脏胆管与其动脉血供及静脉回流的关系。2.将墨汁灌注技术应用到胆管微循环研究领域,成功显示出了大鼠肝门部胆管壁微血管的形态结构,直观展示了PBP的形态结构。3.采用透明化技术成功地解决了序列切片显微微血管特征点的寻找配准难题。采用3D-DOCTOR等软件的显微三维可视化重建技术,在序列切片配准的基础上,通过对图像分割处理,逼真地构建出了胆管周围血管丛(PBP)的三维立体构像,实现三维表面或内部透明显示。4.对比应用HCA+Celsior液,HCA+UW液,Celsior液,UW液灌注大鼠肝脏,并在灌注后再次进行墨汁灌注,并梯度固定脱水后,进行透明化处理,显示整个肝脏的灌注情况,比较四种保存液的优劣。
结果:1.完成了完全保留肝蒂完整的肝脏铸型模型,全面了解肝内外细微的大体解剖结构。2.完成了大鼠胆道微循环模型,为进一步研究胆管微循环形态以及肝脏移植胆道并发症的防治奠定了形态学基础。3.完成了胆道微循环三维构想的重建,使临床医生对胆管周围血管丛的空间立体结构有了更形象的认识。4.通过建立肝脏透明化墨汁灌注模型,发现HCA液结合Celsior液的灌注效果优于其他保存液。
结论:1.通过肝脏胆管血管铸型及胆管周围血管丛(PBP)的研究,为供肝获取时肝动脉必须灌注和肝脏移植胆道微循环保护的理论提供了解剖实验依据,为移植手术各环节防治胆道并发症提供了理论基础。2.使用用墨汁灌注透明技术和计算机显微可视化三维重建技术应用到胆管微循环研究,完成了胆管周围血管丛的空间立体构象,作为“胆道解剖学”研究的新方法、新思路,为移植胆道微循环保护的理论提供解剖形态学的基础。3.证实HCA液结合Celsior液灌注快速获取的肝脏,其保存效果优于单用UW液、Celsior液和HCA+UW液,结合肝胆管周围血管丛的研究提倡采用HCA液联合Celsior液分别灌注肝动脉和门静脉,保护胆道周围血管丛,预防肝移植术后胆道并发症。