论文部分内容阅读
背景:X-连锁淋巴细胞异常增生症(X-linked lymphoproliferative disease,XLP)是一种罕见的X连锁原发性免疫缺陷疾病。该病常由Epstein-Barr病毒(EBV)感染诱发,引起各种免疫细胞功能改变,从而出现噬血淋巴组织细胞增生症( Hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH)或致死性传染性单核细胞增生症(Fatal infectious mononucleosis,FIM)。迄今为止,XLP根据其致病基因的不同,分为两型:XLP-1和XLP-2,相对应的致病基因分别为SH2D1A和XIAP。这两种类型的XLP都具有复杂的临床症状,其中XLP-1型多见的有EBV相关HLH和FIM(60%)、异常丙种球蛋白血症(30%)和恶性淋巴瘤(20%~30%)3种,少见者如再生障碍性贫血、淋巴细胞性脉管炎等。值得一提的是,在XLP-1型患者中,以上临床症状并不一定是单独出现的,各个症状之间可以重叠发生。XLP-2型的临床表现也较为复杂,HLH尤其是复发性HLH尤为常见。XLP患者的临床表现在出现典型症状之前大多数都非常隐匿,由于目前诊断和治疗的手段非常有限,大多数该病患者死于儿童期,即使在使用化疗等治疗手段的情况下,生存率仍然非常低,目前唯一可以根治的方法为骨髓造血干细胞移植(Hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)。目的:由于XLP临床表现多样,在EBV感染前临床症状轻微,早期诊断较为困难,目前针对其两种致病基因SH2D1A和XIAP的突变分析是主要的确诊手段。为了进一步了解此疾病,为临床诊断提供准确可靠的依据,本课题利用基因突变分析和流式细胞分析等手段对两型的XLP进行了临床、基因和蛋白等方面的探讨和研究。方法:跟据患者的临床表现、家族史、免疫学特征等拟诊为XLP。提取患儿及部分亲属的基因组DNA,采用PCR法扩增SH2D1A和XIAP基因,PCR产物直接进行双向序列测定,采用流式细胞仪检测外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中SAP和XIAP蛋白表达及部分XLP-2型患者的NKT细胞数量。结果:本课题分析了21例XLP-1型疑似患者和25例XLP-2型疑似患者,发现并确诊了1例XLP-1型患者和6例XLP-2型患者。所有的XLP患者均发现SH2D1A或BIRC4基因突变。除了1例XLP-2型患者的XIAP蛋白表达正常外,其余XLP患者的SAP和XIAP蛋白表达均明显下降或缺失。XLP-2型患者的NKT细胞数量有显著的下降。结论:通过临床及实验室检查,本课题确诊了1例XLP-1型和6例XLP-2型患者。研究结果表明,除了针对致病基因SH2D1A和XIAP的基因突变分析,采用流式细胞仪检测PBMC中SAP和XIAP蛋白表达及NKT细胞数量也是对该病进行快速诊断的一个重要手段。通过对XLP的发病机理及临床特征进行更加深入的了解和研究,为该病的临床诊断提供了更加科学的依据。