论文部分内容阅读
从北京、河北任丘、保定、张家口、新疆、云南、蒙古等地采集了23份土壤样品分离出木霉菌株114株,筛选到4株产脂肪酶的木霉菌株,编号为:153-1、13-2、30425、西1-1,根据菌株的菌落形态、显微镜观察和ITSrDNA序列测定,鉴定该4菌株分别为哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、长枝木霉(T. longibrachiatum)、哈茨木霉(T.harzianum)、长枝木霉(T. longibrachiatum),其酶活分别为4.79 U/ml、2.41 U/ml、5.32 U/ml、3.30 U/ml。研究了脂肪酶的酶学性质,菌株153-1产生的脂肪酶最适反应温度为45℃,最适反应pH为9.5,金属离子Ca2+、Mg2+、Cu2+、Pb2+等对其活力有抑制作用,而Fe2+、Ba2+、Li2+对其有激活作用;菌株13-2产生的脂肪酶最适反应温度为40℃,最适反应pH为10.0,金属离子Mn2+、Cu2+等对其活力有抑制作用,而K+、Fe2+、Ba2+对其有激活作用;菌株30425产生的脂肪酶最适反应温度为20℃,最适反应pH为7.5,金属离子Li2+、Mn2+、Cu2+等对其活力有抑制作用,而K+、Ca2+、Mg2+对其有激活作用;菌株西1-1产生的脂肪酶最适反应温度为20℃,最适反应pH为9.5,金属离子Ca2+、Cu2+、Pb2+等对其活力有抑制作用,而K+、Ba2+对其有激活作用。对4个菌株所产脂肪酶进行了分离纯化。菌株发酵液经离心浓缩、硫酸铵沉淀、HiPrep DEAE Fast Flow离子交换层析或Resource Q离子交换层析、Superose12凝胶过滤层析等步骤处理,153-1得到组分单一的脂肪酶,13-2得到两个组分的脂肪酶,30425和西1-1未得到有活性的组分,需试验进一步分析。本试验得到2株产低温脂肪酶的木霉,30425和西1-1;3株产碱性脂肪酶的木霉,153-1、13-2和西1-1;其中西1-1产生的脂肪酶是低温碱性脂肪酶,具有良好的开发前景。