含氮杂环芳烃废水的生物降解及其毒性变化

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含氮杂环芳烃化合物(Nitrogen Heterocyclic Compounds, NHCs)的典型废水是焦化废水,它是一类高氮、高毒和强生物抑制性的工业废水,其中的吡啶、喹啉和咔唑又是氮杂环芳烃的代表性污染物,并均具有“三致”效应。焦化废水的处理工艺常用传统的生物处理法,而氮杂环芳烃等有机物在此工艺中处理效果不佳。因此,焦化废水的处理长期以来都是我国工业废水处理的难题。相对于化学法、高级氧化法、物理法等处理方法,传统的生物处理仍具有其特殊的优势,如无二次污染物产生,排水毒性低,投资和运行费用较低等。因此,生物法处理焦化废水仍然具有竞争力。本研究的目的是:利用复合菌剂生物强化降解含氮杂环芳烃废水,解析其共降解机理,探索降解过程中毒性物质的复合毒性变化规律。研究内容包括:从实验室菌种库中优选比较高效菌种,并复配一种复合菌剂;将复合菌剂用于模拟焦化废水和实际焦化废水的降解,研究复合菌剂的降解机理和系统微生物的结构变化,并解析含氮杂环芳烃废水降解过程中遗传毒性变化规律;探讨降解过程中水质指标、系统微生物和遗传毒性的关系。本研究优选出4株高效细菌,分别是Paracoccus sp. BW001(吡啶降解菌)、Shinellazoogloeoides BC0026(吡啶降解菌)、Pseudomonas sp. BW003(喹啉降解菌)、Pseudomonas sp. BW004(喹啉降解菌)、Pseudomonas sp. BC039和Pseudomonas sp.BC046(咔唑降解菌)。并将4株菌制成菌液,按菌密度OD602值的比例BC026:BW00:BC039:BC046=0.10:0.10:0.05:0.05,配制成复合菌剂M19。对比4株单菌与复合菌剂M19对单基质(吡啶或喹啉或咔唑)或三基质(吡啶、喹啉和咔唑共存)的降解,复合菌剂M19对吡啶、喹啉和咔唑均有较强的降解能力,且共基质情况下降解效率有所提高,实验结果显示:单菌完全降解单基质吡啶需要12.1h,复合菌剂完全降解单基质吡啶和复合基质中的吡啶分别需要10.1和14.2h;单菌完全降解单基质喹啉需要9.8h,复合菌剂完全降解单基质喹啉和复合基质中的喹啉分别需要6.2h和4.2h;单菌降解90%的单基质咔唑需要超过21.7h,而复合菌剂降解单基质咔唑和复合基质中的咔唑需要20h,由此可知M19复合菌剂的综合优势表现为快速的同步降解能力。通过跟踪分析M19中的喹啉降解基因qorL和咔唑降解基因carAa,发现两个基因在NHCs降解过程中得到保持;通过分析M19对复合基质的降解中间产物,发现其对喹啉的降解与BW004降解喹啉的路径一致,其中间产物为2(1H)喹诺酮和8-羟基香豆素。由此说明M19中4株降解菌之间没有产生直接联系,均独立作用于各自的目标污染物。利用M19对模拟废水(只含有共基质的吡啶、喹啉和咔唑)和实际焦化废水进行降解,对其水质、微生物和遗传毒性变化进行研究。发现M19对模拟废水和实际焦化废水中的吡啶、喹啉和咔唑均实现100%的去除;TOC、COD等水质指标有所下降;通过PCR扩增功能基因和DGGE技术对实际焦化废水的微生物群落结构进行解析,发现经过M19复合菌剂生物强化的处理系统中,喹啉降解基因qorL和咔唑降解基因carAa稳定表达,而微生物的群落结构和多样性发生变化;通过彗星实验对遗传毒性进行分析,利用彗星率、彗尾DNA百分比(TailDNA%)、尾长(TailLength)和尾矩(TailMoment)数据结果表征遗传毒性。数据比较得出,控制组的数据稍高于实验组,说明M19强化后的系统遗传毒性有所减弱。最后对水质指标、系统微生物和遗传毒性进行冗余分析(RDA,Redundancyanalysis)来阐述它们之间的关系。发现模拟废水中的遗传毒性指标TailDNA%、TailLength和TailMoment均与吡啶、喹啉和咔唑的浓度有关,进一步证明了三类物质能共同造成细胞的DNA损伤;而实际焦化废水处理的结果表明,彗星率与部分含量较高的污染物如苯酚等的浓度有关,TailDNA%、HeadDNA%、TailLength和TailMoment与主要污染物的浓度无直接关系,可能与降解过程产生的中间产物联合作用有关,此外复杂的焦化废水水质也可能与其有关。综上所述,复合菌剂M19对吡啶、喹啉和咔唑有较为高效的降解能力;在M19降解实际焦化废水过程中,改变了系统微生物群落结构和提高了系统中微生物的活性,降解了主要的含氮杂环芳烃有机物,并对焦化废水的遗传毒性降低起到了一定的作用。
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