禽脑脊髓炎(Avian Encephalomyelitis;AE)又称流行性震颤(Epidemictremor)，是由禽脑脊髓炎病毒(AEV)引起的一种主要危害4周龄以下雏鸡，以侵害雏鸡中枢神经系统引起雏鸡非化脓性脑炎为主要病理特征的病毒性传染病，病雏主要表现为运动失调、头颈震颤和后趾麻痹等神经症状。具有突然出现和难以预测持续期等特点，能造成雏鸡的损失和母鸡产蛋率的下降，成为当前世界上危害养禽业发展的主要疫病之一。目前该病尚无有效的药物治疗，预防主要靠疫苗。灭活疫苗的免疫抗体产生较晚，免疫期较短，成本较高，使用不方便等，限制了该苗的推广应用。而弱毒疫苗可以用饮水的方式来免疫种鸡群，使其子代雏鸡通过母源抗体而获得被动免疫，方便高效，在很多国家得到了广泛的应用。目前国内还没有弱毒疫苗研制成功的报道。本研究用青岛易邦生物工程有限公司提供的禽脑脊髓炎病毒（AEV-YBF02株）进行毒力测定和活疫苗种子批的建立。主要研究内容及结果如下：（1）AEV-YBF02毒株毒力测定：毒力测定试验结果显示，病毒的EID50为10—5.7/0.2mL。AEV-YBF02毒株卵黄囊接种6日龄SPF鸡胚，接种后第10日观察，鸡胚不产生明显的病变。脑内接种1日龄SPF雏鸡，在第10日才开始发病，而各强毒株都在第5日左右发病。表明AEV-YBF02是一株毒力较弱的毒株。（2）禽脑脊髓炎弱毒疫苗种子批的建立：将AEV-YBF02毒株在SPF雏鸡脑内连续传12代，再用SPF鸡胚卵黄囊接种连传6代。取每代病毒测EID50和病毒的特异性试验，再分别作无菌、支原体和外源病毒的检验。结果显示：传代过程中病毒比较稳定，各代次病毒的EID50没有显著的变化，病毒能被AEV阳性血清特异性中和，且各代病毒纯净。（3）安全性试验和免疫效力试验：种子批建立以后，取2、5、10、15、18代毒种通过口服、肌肉、翅膀刺种接种1日龄、8～10周龄、180日龄的鸡时，只有口服1日龄的雏鸡会有10%左右的发病率，而其它途径接种不同日龄的鸡都不会引起临床症状。说明该毒株安全，致病力弱。对2、5、10、15、18代毒种进行免疫效力试验，用该毒口服免疫8～10周龄的鸡，免后21日抗体检测为全阳性，直至免后第12周抗体仍保持较高的水平。同时免后21日，用AEV-VR脑内接种攻毒，结果表明各代次毒种的免疫原性差异不显著，10只免疫鸡均保护9只以上，说明该毒免疫原性良好，且传代对各代毒种的免疫原性无显著影响。（4）毒力返强试验： AEV-YBF02株第12代基础种子毒通过口服的方法接种2周龄的SPF雏鸡，同居感染途径连传5代，取同居感染传代后分离的病毒，分别脑内接种1日龄SPF雏鸡、口服接种28日龄SPF鸡和180日龄的产蛋鸡。观察传代后的各代次毒对1、28日龄SPF鸡及产蛋鸡的致病性。结果表明，各代次的毒力基本相同，毒力没有返强，仍为非鸡胚适应毒。根据以上结果显示，AEV-YBF02符合弱毒苗的要求，建立的种子批性稳定安全，免疫原性好，且没有毒力返强现象，可以作活疫苗的种子批。