本研究利用小孢子培养技术对具有较高含油量的甘蓝型油菜7218AB、育118进行小孢子培养,通过对所获得纯合的双单倍体植株进行品质分析,从中获得含油量高且稳定的甘蓝型油菜材料。
　　主要研究结果如下:
　　1.以育118、7218AB、4666、4619等甘蓝型油菜为研究材料进行小孢子培养,结果显示接种材料7218AB、4666分别有60％、37.5％的单株诱导出胚,而1489、4619只有10％、13.3％的单株成功诱导出胚;同一材料不同的单株胚状体形成也有显著差异,4666-10出胚率最高为10.5胚/蕾;4666-3的出胚率相对最低为0.05胚/蕾,出胚率相差高达10.45胚/蕾。表明了甘蓝型油菜游离小孢子培养中不同供体植株基因型其胚状体发生频率差异较大。说明基因型对其胚状体的形成起重要作用。
　　2.以4666和4619为材料,在同一材料同一单株开花后每隔两天选取长度为2.5~4cm的花蕾,采用相同的培养条件进行小孢子培养,两材料在第一次取样时(即两材料刚开始开花)进行小孢子培养,4666-1出胚率为10个/皿,而4619-1没有诱导出胚;到第三次次取样时(约为初花期1周),4666-1和4619-1出胚率都为32.25个/皿其出胚率达到最高值;到第五次取样时(即盛花期),小孢子的出胚率下降幅度很大;说明不同取材时期对胚状体形成有显著影响,小孢子培养可以形成胚状体的时间跨度大约是20天,最佳时期是在油菜初花后4~12天。
　　3.2006年对育118、7218AB进行小孢子培养,分别构建了群体大小为70和50个DH株系的群体。2007年对4666、4619进行小孢子培养,分别构建了群体大小为300个和100个DH株系群体。
　　4.2007年对7218AB、育118未加倍成功的DH0代的株系进行了花托培养,诱导出芽的56个;比较珍贵的材料在小孢子培养效果不理想的情况下,花托直接出芽的离体繁殖技术可作为一种弥补的方法和手段。结果显示,有利于分化出丛生芽的最佳激素配比是5.0mg/L6-BA,0.5mg/L NAA。
　　5.对7218AB、育118的DH系的含油量变异和分布情况进行统计,结果表明:7218ABDH系的含油量变幅为38.95~48.19,变异系数为5.28,其中超过47％的有2份,最高的达到48.19％;育118 DH系的含油量含油量变幅为36.86~49.21,变异系数为6.9,其中超过47％的有9份,最高的达到了49.21％。其它的主要品质性状都表现出一定的遗传变异,变异最大的是芥酸、总硫甙、硬脂酸;其次是油酸,亚麻酸、亚油酸;棕榈酸变异最小。
　　6.2008年对2007年获得的含油量超过44％的19个DH系进行了定向选择,18个株系中,有16个株系的含油量得到提高,含油量提高在0.07~3.35个百分点。获得含油量在48％以上的单株有4株,含油量最高的达到48.67％。这些高含油量DH系材料将为配制高含油量的甘蓝型油菜组合提供材料支持。