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目的研究线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)对大鼠肺微血管内皮细胞活化和通透性的影响及其分子生物学机制,探索创伤后组织细胞破裂释放的线粒体DNA导致系统性炎症及急性肺损伤的机制,为创伤后SIRS及急性肺损伤的救治提供实验依据。方法本研究采用分子生物学、流式细胞仪等技术,探索mtDNA作为一利,源头性损伤相关分子模式直接激活内皮细胞,参与启动全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)的分子机制,探索线粒体DNA启动、转导、调控失控性炎症反应机制。通过大鼠尾静脉注入临床浓度的mtDNA导致急性肺损伤,检测外周血炎症因子TNF-α、IL-6及血管性血友病因子(von Willebrand factor, vWF)、sE-selectin和sICAM-1浓度,检测肺血管通透性；以临床浓度mtDNA刺激体外培养大鼠肺微血管内皮细胞,检测其通透性变化及vWF、sE-selectin和sICAM-1表达水平以及TLR-9mRNA、NF-κB亚单位p65mRNA、I-κB mRNA表达水平；将大鼠肺微血管内皮细胞与中性粒细胞共培养,予mtDNA刺激后观察微血管内皮细胞存活率、中性粒细胞粘附情况。结果10ug/ml mtDNA体内注射导致大鼠急性肺损伤；mtDNA刺激大鼠微血管内皮细胞中的TLR-9mRNA、NF-κB亚单位p65mRNA表达增加,I-κ BmRNA表达降低：mtDNA能直接激活大鼠微血管内皮细胞,显著增加vwF、sE-selectin和sICAM-1表达,使大鼠微血管内皮细胞通透性增加,显著促进大鼠微血管内皮细胞与中性粒细胞的粘附。结论mtDNA能够通过TLR-9激活大鼠微血管内皮细胞NF-κB通路,刺激大鼠微血管内皮细胞产生vwF、sE-selectin和sICAM-1,增加内皮细胞通透性,显著促进与中性粒细胞的粘附。mtDNA激活内皮细胞是创伤后SIRS及ALI的重要启动机制。