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细胞膜是原核生物细胞的重要组成结构,其功能主要涉及能量转换、物质运输以及信息识别与传递等。了解细胞膜的功能与机制,特别是物质的跨膜运输,具有重要的实践意义。我们分别采用BNE、hrCNE等一维电泳、以及native/native、native/SDS-PAGE等二维电泳方法对天蓝色链霉菌的膜蛋白质组进行了分析研究。核酸干扰是影响native电泳的主要因素,为了除去膜组分中核酸成分,在加入DDM抽提膜蛋白之后,我们采用了多种方法去除核酸,结果表明,超速离心是一种有效地去除核酸方法,native电泳性能有了明显提高。我们对BNE、hrCNE-DDM和hrCNE-Triton等三种电泳的最佳上样量进行了比较研究;结果表明,三种电泳的最适上样量均为80-100μg。通过二级质谱分析,我们鉴定了77个蛋白质;其中,61个蛋白质来自hrCNE-Triton/SDS-PAGE二维凝胶,48个蛋白质来自hrCNE-DDM/SDS-PAGE二维凝胶,其余来自hrCNE/hrCNE二维凝胶。根据这些蛋白质的生理功能以及聚合状态,我们对这些蛋白质进行了分类,其中,20个蛋白质分别归属于15个蛋白复合物,包括完整的ATP合酶,细胞色素aa3氧化酶核心酶,Tri1六聚体,GlnA同聚体以及BFR同聚体等。另外,我们鉴定了多个与跨膜运输相关的蛋白,包括BldKB(SCO5113)、OBP(SCO5477)以及ABP(SCO2008)等;BldKB和OBP与寡肽的运输有关,而ABP与氨基酸的运输有关。OBP和BldKB是膜组分中含量最丰富的两个蛋白质,它们是OppA家族的成员,而OppA家族在胞外多肽降解、信号传导等方面具有重要作用。BldKB可能存在三种聚合状态,分别是单体,二聚体以及四聚体;OBP也可能存在三种聚合状态,分别是单体,二聚体以及四聚体;这种多聚体状态很可能是它们转运胞外复杂多肽的一种适应方式。天蓝色链霉菌编码223个脂蛋白,其中40%脂蛋白是溶质结合蛋白,它们与碳水化合物、氨基酸、多肽、核苷以及铁离子运输等密切相关,我们发现并鉴定17个溶质结合蛋白。脂蛋白SCO4884和SCO4885具有PBP1_Bmp A_PnrA_like保守区域,可能与核苷运输有关。我们首先在大肠杆菌BL21中过量表达了脂蛋白SCO4884和SCO4885;根据hrCNE电泳、分子筛以及粒度测定结果,我们确认SCO4884和SCO4885在溶液中均以单体存在。利用等温滴定量热法,我们发现SCO4884、SCO4885与腺苷、脱氧腺苷、胞苷、脱氧胞苷以及尿苷等具有亲和特性,而与鸟苷、脱氧鸟苷以及胸苷等不具有亲和特性。放线紫红素是一种II型聚酮化合物,其碳链合成由聚酮合酶核心酶(PKS)催化。已有研究表明,参与II型聚酮化合物合成的各个酶之间存在相互作用,而且这些酶类可能分布在细胞的不同部位,比如,SCO5074存在于细胞壁,SCO5076、SCO5083以及SCO5084存在于细胞膜,而核心酶SCO5087和SCO5088可能也存在于细胞膜,组成ActKSαβ膜复合物。利用载体pSJ7,我们对聚酮合酶核心酶(SCO5087、SCO5088、SCO5089)以及后修饰酶(SCO5086、SCO5090)进行了克隆表达研究,纯化以后并制备抗体,这些抗体的应用为探索基因簇中各基因的功能、蛋白质相互作用以及聚酮合酶的细胞定位提供了检测手段。