论文部分内容阅读
核酸疫苗(DNA vaccine)是指将含有编码某种抗原蛋白的外源基因序列插入到质粒载体中,该重组质粒就称为核酸疫苗。核酸疫苗又称为基因疫苗。核酸疫苗是继病原体疫苗、亚单位疫苗之后出现的第三代疫苗,与传统的疫苗相比具有多价、高效、价廉、安全等许多优势。白色念珠菌(Candida albicans)是一种寄生在动物和人的口腔和胃肠道的条件致病菌,它可以在机体免疫力下降和正常菌群失调时作为机会病原体,引起机体的浅层感染(也称粘膜性感染)和系统性感染(也称深层感染或全身性感染)。系统性白色念珠菌感染危害巨大,据科学家统计,在使用了抗真菌药物后,该病的死亡率仍高达70%以上。随着发病率和致死率的不断增加,越来越多的科学工作者投入到白色念珠菌免疫学机制的研究中。英国曼彻斯特医学院的Matthews等人长期从事白色念珠菌免疫学方面的研究,他们发现在系统性白色念珠菌感染中热休克蛋白90(Hsp90)起着主要的病理学作用。并确定了Hsp90的抗原表位图谱,发现了2个能够与病人血清起反应的常见表位,即表位C和H,表位C是一种保守表位,能够与所有病人的血清起反应;表位H是白色念珠菌所特有的一种表位,它能够被大约50%的病人血清识别。本实验选择了Hsp90全基因序列中含有编码C、H表位的一段DNA序列,构建了核酸疫苗pcDNA3.1/Hsp90。通过肌肉注射后电转(electroporation)的方式免疫小鼠, Western blot结果表明:经热休克蛋白90重组质粒(pcDNA3.1/Hsp90)免疫小鼠抗血清中产生了抗热休克蛋白90重组蛋白(R-Hsp90)特异性抗体; ELISA结果表明:经pcDNA3.1/Hsp90组免疫后小鼠抗血清中抗R-Hsp90特异性抗体IgG的抗体含量,与pcDNA3.1组和PBS组比较得到了显著提高(P<0.01)。本实验为进一步研究白色念珠菌核酸疫苗奠定了坚实基础。