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研究背景哮喘是一种异质性疾病,具有不同的发病过程,表现为不同的表型。从哮喘触发角度来说,哮喘可分为过敏性哮喘和非过敏性哮喘,这也是临床治疗中最常用的表型分类方法。过敏性哮喘是由于接触外界过敏原,导致2型细胞因子升高而引起的慢性气道炎症,通常伴随着嗜酸性粒细胞的升高。非过敏性哮喘与过敏原无关,由环境因素如空气污染物、病毒或细菌感染、肥胖等所引起。2型细胞因子和嗜酸性粒细胞通常被认为与过敏性反应相关。越来越多研究表明,尽管缺少过敏原,2型免疫反应和嗜酸性粒细胞升高同样存在于非过敏性哮喘。过敏性哮喘中,导致嗜酸性粒细胞升高、气道高反应和粘液产生的炎症过程依赖于2型辅助 T(T helper 2,Th2)细胞和 2 型固有免疫细胞(type 2 innate lymphoid cells,ILC2),而非过敏性哮喘中2型细胞因子和嗜酸性粒细胞升高的潜在机制尚不明确。据报道,ILC2可能参与非过敏性哮喘中2型细胞因子的产生,并与非过敏性哮喘中的嗜酸性粒细胞升高相关,但目前尚无相关的临床证据。糖皮质激素仍是治疗哮喘的主要药物,治疗过敏性哮喘患者的效果显著,对非过敏性哮喘的疗效则较差。研究表明,ILC2对糖皮质激素具有强烈的抵抗性。明确ILC2是否参与非过敏性哮喘的气道炎症过程有助于研发新型的、特异的非治疗过敏性哮喘的方法。研究目的目前对肺内ILC2的研究多集中于其在过敏性疾病中的作用,对其在非过敏性疾病中作用的研究则较少。我们将探索ILC2介导的固有免疫是否参与非过敏性哮喘的发病过程及其与非过敏性哮喘患者中的2型细胞因子和嗜酸性粒细胞的关系,这将有助于研发新型的、特异的治疗非过敏性哮喘的方法。研究方法本实验募集了 2018年11月至2019年9月至山东大学齐鲁医院就诊的47例哮喘患者,同时募集15名健康成人作为对照。我们收集了参与者包括年龄、性别、BMI在内的临床数据。外周血嗜酸性粒细胞计数委托山东大学齐鲁医院医院检验科进行检测。采集参与者的外周血,并提取血清、血浆。运用流式细胞术检测外周血ILC2水平;用吸入性过敏原过筛实验(Phadiatop)检测血清特异性免疫球蛋白E(specific immunoglobulin E,sIgE)水平;用酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆总免疫球蛋白E(total immunoglobulin E,tIgE)水平、白细胞介素 5(interleukin-5,IL-5)浓度和IL-13的浓度;所有患者均进行肺功能检查。根据sIgE和外周血中嗜酸性粒细胞计数,哮喘患者被分为4组:过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘、过敏性非嗜酸性粒细胞升高型哮喘、非过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘、非过敏性非嗜酸性粒细胞升高型哮喘。我们分析了不同组间ILC2水平和2型细胞因子浓度的差异,并分别对ILC2和嗜酸性粒细胞的相关因素进行相关性分析。所有数据分析均采用SPSS Statisics 23.0。研究结果非过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘患者的ILC2水平高于健康对照组和非过敏性非嗜酸性粒细胞升高型哮喘患者,过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘患者的ILC2水平与非过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘哮喘患者无统计学差异。非过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘患者的的IL-5浓度高于健康对照组和非过敏性非嗜酸性粒细胞升高型哮喘患者的,过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘患者的IL-5水平与非过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘哮喘患者无统计学差异。非过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘患者的IL-13浓度显著高于健康对照组。皮尔森相关分析表明,非过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘患者的ILC2水平与嗜酸性粒细胞计数(r=0.653,p=0.008)、IL-5 浓度(r=0.622,p=0.013)、IL-13 浓度(r=0.520,p=0.047)、tIgE水平(r=0.522,p=0.046)均呈正相关。斯皮尔曼相关分析显示过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘患者的ILC2水平与sIgE浓度无相关性(r=0.125,p=0.676)。皮尔森相关分析显示,非过敏性嗜酸性粒细胞升高型哮喘患者的嗜酸粒细胞计数与IL-5水平呈正相关(r=0.591,p=0.02),与IL-13无相关性(r=0.423,p=0.117)。研究结论①除过敏性哮喘外,ILC2在非过敏性哮喘患者的外周血中升高,可能在非过敏性哮喘的的病理生理过程中发挥重要作用。②ILC2是非过敏性哮喘IL-5、IL-13的潜在来源;ILC2可能介导非过敏性哮喘的嗜酸性粒细胞炎症,并且这个过程可能依赖IL-5完成。